Question

【題目】為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測(cè)定了該河流水樣中的細(xì)菌含量，并進(jìn)行了細(xì)菌分離等工作�；卮鹣铝袉�(wèn)題：

（1）通常培養(yǎng)基采用____________法滅菌；在制備固體培養(yǎng)基的倒平板操作時(shí)，待平板冷卻至_______左右時(shí)，應(yīng)將平板倒過(guò)來(lái)放置，這樣做的目的是___________________________。

（2）該小組采用稀釋涂布平板法檢測(cè)水樣中細(xì)菌含量。在涂布接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是____________________；然后，將1mL水樣稀釋100倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37,據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為___________。

（3）該小組采用平板劃線法分離水樣中的細(xì)菌，操作時(shí)，接種環(huán)通過(guò)___________滅菌，在第二次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線，這樣做的目的是__________________。

（4）示意圖A和B中，________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。

（5）該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進(jìn)行靜置培養(yǎng)，另一部分進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細(xì)菌比靜置培養(yǎng)的細(xì)菌生長(zhǎng)速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中________的含量，同時(shí)可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高________的利用率。

Answer 1

【答案】高壓蒸汽滅菌 50℃ 防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染 檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格 3.8×107 灼燒 將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個(gè)菌落 B 溶解氧 營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)

【解析】

本題是對(duì)微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)過(guò)程中對(duì)實(shí)驗(yàn)用品進(jìn)行滅菌常用的方法及檢測(cè)培養(yǎng)基滅菌是否徹底的方法、估算樣品中菌株數(shù)的方法、微生物常用的接種方法和具體操作步驟的綜合性考查，回憶和梳理相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，尤其是一些實(shí)驗(yàn)的細(xì)節(jié)，據(jù)此答題。

（1）微生物培養(yǎng)過(guò)程應(yīng)該進(jìn)行無(wú)菌操作，配制的培養(yǎng)基要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌；倒平板操作的最適溫度為培養(yǎng)基冷卻至50℃左右，倒平板的作用是防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。

（2）為了檢測(cè)培養(yǎng)基滅菌是否徹底，應(yīng)該取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間。根據(jù)題意分析，3個(gè)平板的菌落數(shù)分別是39、38和37，且稀釋了100倍，體積為0.1mL，因此每升水樣中的活菌數(shù)=（39+38+37）÷3÷0.1×100×1000=3.8×107個(gè)。

（3）在平板劃線法分離菌種的過(guò)程中，對(duì)接種環(huán)常用的滅菌方法是灼燒滅菌；在第二次及以后的劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線的目的是將聚集的菌體逐漸稀釋分散以便獲得由單個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的菌落。

（4）據(jù)圖分析，圖中A表示平板劃線法，B表示稀釋涂布平板法。

（5）根據(jù)題意分析，振蕩培養(yǎng)不僅提高了培養(yǎng)液中溶解氧的含量，還可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，這樣可以提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率，使細(xì)菌生長(zhǎng)速度加快。