Question

【題目】我們?nèi)粘３缘拇竺字需F含量極低，科研人員通過基因工程等技術(shù)，培育出了鐵含量比普通大米高60%的轉(zhuǎn)基因水稻，改良了稻米的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)．如圖為培育轉(zhuǎn)基因水稻過程示意圖，請(qǐng)分析回答．
（1）為了在短時(shí)間內(nèi)獲得大量鐵結(jié)合蛋白基因，可以采用技術(shù)．與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制時(shí)的解旋過程相比，該技術(shù)的DNA解鏈過程有何不同？（寫出一點(diǎn)即可）
（2）構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒時(shí)，通常先要用分別切割含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒，以使目的基因能插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的中．將重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌時(shí)，可以用處理農(nóng)桿菌，使重組Ti質(zhì)粒易于導(dǎo)入．然后用該農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞，通過DNA重組將目的基因插入植物細(xì)胞的上．
（3）將含有重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌與水稻愈傷組織共同培養(yǎng)時(shí)，通過培養(yǎng)基2的篩選培養(yǎng)，可以獲得；檢測(cè)培育轉(zhuǎn)基因水稻的目的是否達(dá)到，需要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因稻米 ．

Answer 1

【答案】
（1）PCR；不需要解旋酶
（2）（同種）限制酶； T﹣DNA； Ca2+（氯化鈣）；染色體DNA
（3）含有重組質(zhì)粒的愈傷組織；鐵的含量
【解析】解：（1）PCR技術(shù)可在體外大量擴(kuò)增目的基因，因此為了在短時(shí)間內(nèi)獲得大量鐵結(jié)合蛋白基因，可以采用PCR技術(shù)．與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制時(shí)的解旋過程相比，該技術(shù)的DNA解鏈過程不需要解旋酶，通過高溫變性達(dá)到解旋的目的．（2）農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T﹣DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上．根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點(diǎn)，如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T﹣DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA上．構(gòu)建重組Ti質(zhì)粒的過程中，通常要用同一種限制酶分別切割Ti質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段，使以使目的基因能插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T﹣DNA中．將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞時(shí)常用用感受態(tài)轉(zhuǎn)化法，即用CaCl2溶液處理農(nóng)桿菌使之成為感受態(tài)細(xì)胞，易于重組Ti質(zhì)粒導(dǎo)入．然后用該農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞，通過DNA重組將目的基因插入植物細(xì)胞的染色體DNA上．（3）將含有重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌與水稻愈傷組織共同培養(yǎng)時(shí)，通過培養(yǎng)基2的篩選培養(yǎng)，可以獲得含有重組質(zhì)粒的愈傷組織．該基因工程的目的基因?yàn)殍F結(jié)合蛋白基因，因此檢測(cè)培育轉(zhuǎn)基因水稻的目的是否達(dá)到，需要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因水稻種子中鐵含量．

所以答案是：（1）PCR 不需要解旋酶（2）（同種）限制酶　 T﹣DNA　 Ca2+（氯化鈣）　 染色體DNA（3）含有重組質(zhì)粒的愈傷組織　　鐵的含量

【考點(diǎn)精析】通過靈活運(yùn)用基因工程的原理及技術(shù)，掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術(shù)即可以解答此題．