Question

江蘇卷32．(7分)某生物興趣小組開展DNA粗提取的相關(guān)探究活動。具體步驟如下：

材料處理：稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2份．每份l0 g。剪碎后分成兩組，一組置于20℃、另一組置于一20℃條件下保存24 h。

DNA粗提�。�

第一步：將上述材料分別放人研缽中，各加入l5 mL研磨液，充分研磨。用兩層紗布過濾．

　 取濾液備用。

第二步：先向6只小燒杯中分別注人10mL濾液，再加人20 mL體積分?jǐn)?shù)為95％的冷酒精

　 溶液，然后用玻璃棒緩緩地向一個方向攪拌，使絮狀物纏繞在玻璃棒上。

第三步：取6支試管，分別加入等量的2 mol／L NaCl溶液溶解上述絮狀物。

DNA檢測：在上述試管中各加入4 mL二苯胺試劑。混合均勻后，置于沸水中加熱5 min，待試管冷卻后比較溶液的顏色深淺,結(jié)果如下表。

材料保存溫度	花菜	辣椒	蒜黃
20℃	++	+	+++
—20℃	+++	++	++++

　　 （注：“+”越多表示藍(lán)色越深）

分析上述實驗過程，回答下列問題：

(1)該探究性實驗課題名稱是 　　　　。

(2)第二步中”緩緩地”攪拌，這是為了減少 　　　　。

(3)根據(jù)實驗結(jié)果，得出結(jié)論并分析。

①結(jié)論1：與20℃相比，相同實驗材料在-20℃條件下保存，DNA的提取量較多。

結(jié)論2： 　　　　。

②針對結(jié)論I．請?zhí)岢龊侠淼慕忉專?u> 　　　　。

(4)氯仿密度大于水，能使蛋白質(zhì)變性沉淀，與水和DNA均不相溶，且對DNA影響極小。為了進(jìn)一步提高DNA純度，依據(jù)氯仿的特性．在DNA粗提取第三步的基礎(chǔ)上繼續(xù)操作的步驟是： 　　　　 。然后用體積分?jǐn)?shù)為95％的冷酒精溶液使DNA析出。

 

Answer 1

（1）探究不同材料和不同保存溫度對DNA提取量的影響

（2）DNA斷裂

（3）①等質(zhì)量的不同實驗材料，在相同的保存溫度下，從蒜黃提取的DNA量最多

⑦低溫抑制了向光酶的活性，DNA降解速度慢

（4）將第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混合，靜置一段時間，吸取上清液

 

本題考查了DNA粗提取技術(shù)的原理、操作過程及同學(xué)分析、判斷能力，從題目實驗看出，該實驗的課題是探究不同材料和不同保存溫度對DNA提取量的影響。在試用第二步中，為了防止DNA斷裂，要緩緩的攪拌，從表中結(jié)果看出，由于低溫抑制了相關(guān)酶的活性，DNA降解慢，使得相同材料在低溫保存下，DNA提取量大，在相同條件先，蒜黃藍(lán)色最深，說明相同條件下從蒜黃中提取的DNA量最大，由于氯仿密度比水大，可使蛋白質(zhì)變性后沉淀，而與水、DNA不相溶，這樣可將第三步獲得的溶液與等量的氯仿混合，靜置一段時間，吸取上清液即可得到較純凈的DNA。