Question

【題目】隨著全球氣候變暖，凍土融化，很多年前被埋起來的古細菌如炭疽桿菌孢子可能被釋放出來。炭疽桿菌兩端截平、呈竹節(jié)狀排列，菌落呈卷發(fā)狀，可引起一種人畜共患傳染病——炭疽病。對炭疽病疑似患者，可根據(jù)噬菌體的宿主專一性，通過實驗確診。

（1）細菌培養(yǎng)：

①為從炭疳病疑似患者體內(nèi)分離出炭疽桿菌，將采集到的患者皮膚膿胞滲出物稀釋后滴于培養(yǎng)基表面，用涂布器涂勻，這種接種方法稱為_________________________。

②用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時是否需要對照組？___________________。為什么__________________。

（2）細菌鑒定：實驗流程如圖所示。

①挑選可疑菌落制片后，用顯微鏡觀察，可看到呈竹節(jié)狀排列的桿菌。

②對配制的液體培養(yǎng)基等需采取高壓蒸汽滅菌：實驗所用液體培養(yǎng)基的碳源為_____________（填“無機碳”或“有機碳”）。

③接種可疑菌后，35℃培養(yǎng)24h，液體培養(yǎng)基變渾濁，原因是________________________，對照組試管中應加入_____________，與實驗組同時培養(yǎng)6h后，若實驗組液體培養(yǎng)基的渾油度比對照組_________（填“高”或“低”），則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除。

（3）對排除的疑似患者及易感人群，可接種炭疽桿菌疫苗，剌激機體產(chǎn)生相應抗體。與產(chǎn)生抗體相關的細胞除T細胞、B細胞外，還有_____________和_____________。

Answer 1

【答案】 稀釋涂布平板法 需要 因為需要判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染（培養(yǎng)基滅菌是否合格） 有機碳 細菌大量繁殖 等量生理鹽水 低 吞噬細胞 漿細胞（效應B細胞）

【解析】試題分析：本題考查微生物的相關知識點，考查的知識點有微生物的培養(yǎng)、以及實驗設計。微生物培養(yǎng)基的基本成分：水、無機鹽、碳源、氮源及特殊生長因子；無菌操作，包括滅菌和消毒兩種方式；微生物的接種：微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，常用來統(tǒng)計樣品活菌數(shù)目的方法是稀釋涂布平板法。

（1）①微生物常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，后者需要將采集到的患者皮膚膿胞滲出物稀釋后滴于培養(yǎng)基表面，并用涂布器涂勻。

②用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時需要設置對照組，以判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染（培養(yǎng)基滅菌是否合格）。

（2）②炭疽桿菌是異養(yǎng)微生物，因此實驗所用液體培養(yǎng)基的碳源為有機碳。

③接種可疑菌后，35℃培養(yǎng)24小時，細菌大量繁殖，導致液體培養(yǎng)基變渾濁；根據(jù)實驗的單一變量原則，對照組試管中應加入等量生理鹽水，與實驗組同時培養(yǎng)6小時后，若實驗組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對照組低，則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除。

（3）對排除的疑似患者及易感人群，可接種炭疽桿菌疫苗，刺激機體產(chǎn)生相應抗體，與產(chǎn)生抗體相關的細胞除T細胞、B細胞外，還有吞噬細胞、效應B細胞。