Question

【題目】為研究不同濃度靈芝多糖對體外培養(yǎng)的正常小鼠和腫瘤小鼠的巨噬細胞吞噬功能的影響，請利用以下材料完成相關(guān)實驗

材料與用具：生長狀況相似的健康小鼠若干只、小鼠肉瘤細胞、動物細胞培養(yǎng)液、雞紅細胞、用培養(yǎng)液配制的靈芝多糖溶液(低、中、高濃度)、顯微鏡、二氧化碳培養(yǎng)箱等。

說明：巨噬細胞可吞噬雞紅細胞，其吞噬功能可用吞噬率反映，即檢査100個巨噬細胞中已發(fā)生吞噬作用的巨噬細胞數(shù)。獲得巨噬細胞的方法和具體檢測方法不作要求。)

（1）完善實驗思路：

①將生長狀況相同的健康小鼠隨機分為2組，編號甲、乙。乙組小鼠注射一定量的小鼠肉瘤細胞，飼養(yǎng)一段時間后，選擇腫瘤模型鼠。

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（2）分析與討論

①巨噬細胞能通過細胞膜上的___________與異物結(jié)合，將異物吞入細胞內(nèi)，形成吞噬泡后與細胞內(nèi)的_____________融合而將異物消化分解。

②實際觀察表明，時間過長會造成吞噬率下降，其原因是__________。

③研究發(fā)現(xiàn)本實驗中的靈芝多糖溶液均可提高小鼠巨噬細胞的吞噬率，且濃度越高促進作用越強。請用柱形圖表示正常小鼠組的實驗結(jié)果。

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Answer 1

【答案】②取甲組小鼠的巨噬細胞平均分為4組，編號甲1至甲4(0.5分)；取乙組小鼠的巨噬細胞平均分為4組編號乙1至乙4；每組重復(fù)若干樣品(0.5分)

③將等量不含靈芝多糖的培養(yǎng)液和含低、中、高濃度靈芝多糖的溶液分別加入甲1乙1、甲2乙2…甲4乙4樣品中(0.5分)，分別在二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時間(0.5分)。

④從每組培養(yǎng)液中取出等量的巨噬細胞，加入等量雞紅細胞，培養(yǎng)一定的時間后，制作臨時裝片(0.5分)，在顯微鏡下計數(shù)100個巨噬細胞中吞噬有雞紅細胞的巨噬細胞數(shù)，即為吞噬百分率(0.5分)。

⑤統(tǒng)計并分析數(shù)據(jù) 受體 溶酶體 被吞噬的雞紅細胞時間過長可被消化降解而觀察不到吞噬現(xiàn)象

【解析】

該實驗的實驗?zāi)康氖茄芯坎煌瑵舛鹊撵`芝多糖對正常小鼠和腫瘤小鼠巨噬細胞吞噬功能的影響。方法采用不同濃度的靈芝多糖體外培養(yǎng)正常小鼠和腫瘤小鼠巨噬細胞，吞噬雞紅細胞實驗，制作臨時裝片，固定染色后置于顯微鏡下觀察，計數(shù)正常小鼠和腫瘤小鼠巨噬細胞吞噬雞紅細胞的數(shù)目，并計算吞噬率。

（1）①實驗需探究不同濃度的靈芝多糖對正常小鼠和腫瘤小鼠巨噬細胞吞噬功能的影響，根據(jù)實驗所給材料，培養(yǎng)液配制的靈芝多糖溶液（低、中、高濃度），而因此一般正常小鼠和腫瘤小鼠的吞噬細胞各分為四組，分別取等量低、中、高濃度的靈芝多糖溶液加入到細胞培養(yǎng)瓶中，各另取一個培養(yǎng)瓶不加靈芝多糖，作為空白對照。將樣品分別在二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時間，從每組培養(yǎng)液中取出等量的巨噬細胞，加入等量雞紅細胞，培養(yǎng)一定時間后，制片，計數(shù)，計算吞噬率。因此在獲得腫瘤模型鼠后的實驗設(shè)計思路為：②取甲組小鼠的巨噬細胞平均分為4組，編號甲1至甲4；取乙組小鼠的巨噬細胞平均分為4組，編號乙1至乙4；每組重復(fù)若干樣品。

③將等量不含靈芝多糖的培養(yǎng)液和含低、中、高濃度靈芝多糖的溶液分別加入甲1乙1、甲2乙2…甲4乙4樣品中，分別在二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時間。

④從每組培養(yǎng)液中取出等量的巨噬細胞，加入等量雞紅細胞，培養(yǎng)一定的時間后，制作臨時裝片，在顯微鏡下計數(shù)100個巨噬細胞中吞噬有雞紅細胞的巨噬細胞數(shù)，即為吞噬百分率。

（2）①巨噬細胞能通過細胞膜上的受體與異物結(jié)合，將異物吞入細胞內(nèi)，形成吞噬泡被溶酶體消化分解。

②如果從每組培養(yǎng)液中取出等量的巨噬細胞，加入等量雞紅細胞后，培養(yǎng)一定時間后，鏡下可見吞噬細胞核呈藍色，被吞噬的雞紅細胞呈橢圓形，其胞漿呈紅色而核被染成藍色。若培養(yǎng)時間過長，被吞噬的雞紅細胞可被消化降解而觀察不到吞噬現(xiàn)象。

③根據(jù)題意可知，靈芝多糖溶液均可提高小鼠巨噬細胞的吞噬率，且濃度越高促進作用越強。故橫坐標為0、低、中、高三種濃度的靈芝多糖溶液，縱坐標為吞噬率，并且吞噬率依次增大。