Question

【題目】類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）是一種自身免疫病，致殘性強。研究表明，該病的病理改變與腫瘤壞死因子-α（TNF-α）密切相關(guān)，而一種人鼠嵌合的抗TNF-α單克隆抗體能有效治療RA。下圖為該單克隆抗體制備過程示意圖。

（1）圖中的抗原A是______________，常用的促融劑是_______________。細胞融合完成后，融合體系中除含有未融合的細胞和雜交瘤細胞外，可能還有骨髓瘤細胞自身融合細胞、淋巴細胞自身融合細胞。體系中出現(xiàn)多種類型細胞的原因是________________。

（2）HAT培養(yǎng)基的作用是經(jīng)選擇性培養(yǎng)篩選出雜交瘤細胞，之后還需要進行__________培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選，就可獲得能分泌單一抗體的雜交瘤細胞。最后獲得的雜交瘤細胞只能產(chǎn)生一種單一抗體的原因是___________________。

（3）單克隆抗體的特點是__________________。單克隆抗體的制備涉及細胞工程中的動物細胞融合技術(shù)和____________技術(shù)。

（4）單克隆抗體主要的用途有：_______________________________（至少答兩點）。

Answer 1

【答案】腫瘤壞死因子-α（或TNF-α） 聚乙二醇（PEG） 細胞融合是隨機的，且融合率達不到100% 克隆化培養(yǎng) 每一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體 特異性強、靈敏度高、可大量制備 動物細胞培養(yǎng) 作為診斷試劑、用于治療疾病、用于運載藥物

【解析】

單克隆抗體是由單一B細胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對某一特定抗原的抗體。通常采用雜交瘤技術(shù)來制備，雜交瘤抗體技術(shù)是在細胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上，將具有分泌特異性抗體能力的效應(yīng)B細胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細胞融合為雜交瘤細胞，雜交瘤細胞既能產(chǎn)生抗體，又能無限增殖。用具備這種特性的單個雜交瘤細胞培養(yǎng)成細胞群，可制備針對一種抗原的特異性抗體即單克隆抗體。

題圖分析，單抗制備過程為：將特定的抗原注射小鼠→篩選出產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞→誘導(dǎo)細胞融合→用HAT培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞→篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞→大規(guī)模培養(yǎng)獲得單克隆抗體。單克隆抗體典型優(yōu)點是特異性強、靈敏度高、可大量制備。
動物細胞培養(yǎng)技術(shù)是動物細胞工程的基礎(chǔ)，是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。單克隆抗體最廣泛的用途是作為診斷試劑，也可用于治療疾病、用于運載藥物，主要是用于癌癥治療、也有少量是是用于其他治療的。

（1）要制備抗TNF-a單克隆抗體需要給小鼠注射腫瘤壞死因子a(TNF-a)，即圖中的抗原A。常用物理或化學(xué)方法促融，最常用的化學(xué)促融劑是聚乙二醇(PEG)，細胞融合完成后，由于細胞融合是隨機的，且融合率達不到100%，所以細胞融合完成后，融合體系中除含有未融合的細胞和雜交瘤細胞外，可能還有骨髓瘤細胞自身融合細胞、淋巴細胞自身融合細胞。
（2）HAT培養(yǎng)基的作用是選擇性培養(yǎng)篩選出雜交瘤細胞，在抗體檢測之前需要進行克隆化培養(yǎng)，以增加雜交瘤細胞數(shù)量。經(jīng)多次篩選，就可獲得能分泌單一抗體的雜交瘤細胞。雜交瘤細胞只能產(chǎn)生一種單一抗體的原因是每一個B淋巴細胞只分泌一種特異性抗體。

（3）單克隆抗體典型優(yōu)點是特異性強、靈敏度高、可大量制備。動物細胞培養(yǎng)技術(shù)是動物細胞工程的基礎(chǔ)，單克隆抗體技術(shù)是動物細胞工程的應(yīng)用之一。故單克隆抗體的制備涉及細胞工程中的動物細胞融合技術(shù)和動物細胞培養(yǎng)技術(shù)。

（4）單克隆抗體最廣泛的用途是作為診斷試劑，也可用于治療疾病、用于運載藥物，主要是用于癌癥治療、也有少量是是用于其他治療的。