【題目】許多大腸桿菌的質(zhì)粒上含有l(wèi)acZ′基因(內(nèi)含EcoRI的酶切位點),其編碼的產(chǎn)物β﹣半乳糖苷酶在X﹣gal 和IPTG存在下,可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀,使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色,否則菌落呈現(xiàn)白色.基因工程中常利用該原理從導(dǎo)入質(zhì)粒的受體細(xì)胞中篩選出真正導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)胞,過程如圖所示.請據(jù)圖回答:

(1)限制酶EcoRⅠ的識別序列和酶切位點是﹣G↓AATTC﹣,SmaⅠ的識別序列和酶切位點是﹣CCC↓GGG﹣.圖中目的基因被切割下來和質(zhì)粒連接之前,需在目的基因的右側(cè)連接相應(yīng)的末端,連接的末端序列是
(2)獲得目的基因后,常利用技術(shù)在體外將其大量擴(kuò)增.
(3)在構(gòu)建基因表達(dá)載體的過程中,除了目的基因外,還必須有復(fù)制原點和標(biāo)記基因等.
(4)轉(zhuǎn)化過程中,大腸桿菌應(yīng)先用處理,使其成為細(xì)胞.
(5)菌落①②③中顏色為白色的是 , 原因是
(6)菌落③中的目的基因是否表達(dá),可采用的分子檢測辦法是

【答案】
(1)﹣TTAA
(2)PCR
(3)啟動子;終止子
(4)Ca2+;感受態(tài)細(xì)胞
(5)菌落③;lacZ′標(biāo)記基因區(qū)插入外源基因后被破壞,不能表達(dá)出β﹣半乳糖苷酶,故菌落為白色
(6)抗原﹣抗體雜交
【解析】解:(1)由圖可知,目的基因的左側(cè)有限制酶EcoRI的識別序列,右側(cè)是限制酶Sma I的識別序列,而質(zhì)粒上只有限制酶EcoRI的識別序列,所以需要用限制酶EcoRI來切割質(zhì)粒,用限制酶EcoRI和Sma I來切割含有目的基因的外源DNA分子,這樣就使目的基因右側(cè)無法與質(zhì)粒連接,所以目的基因被切割下來和質(zhì)粒連接之前,需在目的基因的右側(cè)連接限制酶EcoRI切割形成的末端,即﹣TTAA.(2)獲得目的基因后,常利用PCR技術(shù)在體外將其大量擴(kuò)增.(3)基因表達(dá)載體的組成包括目的基因、啟動子、終止子、復(fù)制原點和標(biāo)記基因等.(4)將目的基因?qū)氪竽c桿菌細(xì)胞之前,應(yīng)先用Ca2+處理大腸桿菌,使其處于能吸收周圍DNA的感受態(tài).(5)用限制酶EcoRI切割質(zhì)粒時,會破壞質(zhì)粒上的lacZ'基因,但切割后的質(zhì)粒自身環(huán)化后,lacZ'基因又被修復(fù),能表達(dá)產(chǎn)生B﹣半乳糖苷酶,在X﹣gal和IPTG 存在下,可以產(chǎn)生藍(lán)色沉淀,使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色,所以菌落①②呈現(xiàn)藍(lán)色;菌落③導(dǎo)入的是重組質(zhì)粒,其lacZ'基因被破壞,不能表達(dá)產(chǎn)生B﹣半乳糖苷酶,在X﹣gal和IPTG 存在下,菌落顏色為白色.(6)檢測目的基因是否表達(dá)產(chǎn)生蛋白質(zhì),可采用抗原一抗體雜交法.
【考點精析】掌握基因工程的原理及技術(shù)是解答本題的根本,需要知道基因工程的原理是利用DNA重組技術(shù).

練習(xí)冊系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】探究不同的溫度對酶活性的影響實驗中,溫度和pH分別屬于

A自變量和因變量

B因變量和無關(guān)變量

C自變量和無關(guān)變量

D無關(guān)變量和無關(guān)變量

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】下列雜交實驗中,發(fā)生了性狀分離的是( )

A. 白色綿羊和黑色綿羊雜交,后代既有白色綿羊,也有黑色綿羊

B. 豌豆的黃色皺粒與綠色圓粒雜交,后代均為黃色圓粒

C. 毛腿雞和毛腿雞雜交,后代既有毛腿雞,也有長腿雞

D. 紅眼果蠅雌雄之間交配,后代中既有紅眼果蠅,又有白眼果蠅

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】如圖是描述生命現(xiàn)象的模型(部分),以下相關(guān)敘述正確的是(
A.若A代表下丘腦,a為血糖濃度下降,則b、c可分別代表胰島素和腎上腺素分泌增加
B.若A代表棉鈴蟲種群,a為誘捕雄蟲,則b、c可分別代表性別比例失調(diào)和種群密度下降
C.若A代表草原,a為過度放牧,則b、c可分別代表土地荒漠化和抵抗力穩(wěn)定性提高
D.若A代表人體B淋巴細(xì)胞,a為抗原刺激,則b、c可分別代表抗體和記憶細(xì)胞

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】基因是指

A. DNA分子的所有片段 B. DNA分子中所有脫氧核苷酸的排列順序

C. DNA分子的一條鏈 D. 有遺傳效應(yīng)的DNA片段

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】下列關(guān)于人體免疫的敘述,正確的是

AT細(xì)胞受到抗原刺激后可直接轉(zhuǎn)變?yōu)樾?yīng)T細(xì)胞

B漿細(xì)胞產(chǎn)生的抗體可消滅宿主細(xì)胞內(nèi)的結(jié)核桿菌

C過敏反應(yīng)是人體特異性免疫應(yīng)答的一種異常生理現(xiàn)象

D人體內(nèi)的吞噬細(xì)胞只參與非特異性免疫過程

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】現(xiàn)有一長度為3000個堿基對(bp)的線性DNA分子,用限制酶切后,進(jìn)行凝膠電泳,使降解產(chǎn)物分開.用酶H單獨酶切,結(jié)果如圖1(含2000bp和1000bp兩種DNA片段).用酶B單獨酶切,結(jié)果如圖2.用酶H和酶B同時酶切,結(jié)果如圖3.該DNA分子的結(jié)構(gòu)及其酶切圖譜是( )

A.
B.
C.
D.

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】如圖是某動物組織細(xì)胞部分結(jié)構(gòu)及生理過程的示意圖.請據(jù)圖回答:

(1)在人體內(nèi)膽固醇既是組成的重要成分,又參與血液中的運輸.膽固醇合成后以低密度脂蛋白(LDL)形式進(jìn)入血液,細(xì)胞需要時LDL與細(xì)胞膜上的結(jié)合成復(fù)合物以方式運輸進(jìn)入細(xì)胞.
(2)圖中過程⑥→⑨說明溶酶體具有的功能,溶酶體的功能說明其膜的結(jié)構(gòu)特點是
(3)若該細(xì)胞還能分泌某種蛋白質(zhì),則與其合成、加工、分泌有關(guān)的膜性細(xì)胞器為
(4)若用某種化學(xué)藥品處理此細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞吸收鈣離子數(shù)量明顯減少,但對其它物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞沒有影響,說明受化學(xué)藥品影響的是

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】氰化物進(jìn)入細(xì)胞后,會妨礙線粒體的功能,使組織細(xì)胞不能利用O2,引起細(xì)胞窒息。在培養(yǎng)植物根尖的培養(yǎng)液中加入一定量的氰化物后,根尖細(xì)胞吸收K+的速率隨之降低(如圖)。下列分析不正確的是

A. 正常組織細(xì)胞中,O2在線粒體基質(zhì)中與[H]結(jié)合生成H20

B. 植物根尖細(xì)胞吸收K+的方式屬于主動運輸

C. 4h后根尖細(xì)胞轉(zhuǎn)運所消耗的ATP可能來自細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)

D. 推測氰化物中毒后,O2仍能進(jìn)入人體紅細(xì)胞并與血紅蛋白結(jié)合

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