【題目】酵母菌的蛋白質(zhì)可作為飼料蛋白的來源，有些酵母菌能以工業(yè)廢甲醇作為碳源，研究人員擬從土壤樣品中分離出可利用工業(yè)廢甲醇的酵母菌，這樣既能減少污染又可變廢為寶。下圖為主要操作流程示意圖。

回答下列問題：

（1）配制培養(yǎng)基時，按照培養(yǎng)基配方準(zhǔn)確稱量各組分，將其溶解、定容后，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的____，及時對培養(yǎng)基進(jìn)行分裝，并進(jìn)行高壓蒸汽滅菌：在加熱排除高壓鍋內(nèi)原有的____后，將高壓鍋密閉，繼續(xù)加熱，通常在____的條件下，維持15-30min，可達(dá)到良好的滅菌效果。

（2）取步驟②中梯度稀釋后的適量液體加入無菌培養(yǎng)皿，然后將高壓蒸汽滅菌后的培養(yǎng)基冷卻至____（25℃/50℃/80℃）左右時倒入培養(yǎng)皿混勻（步驟⑧），冷凝后將培養(yǎng)皿倒置，在適宜的條件下培養(yǎng)一段時間。

（3）挑取平板中長出的單菌落，按步驟④所示進(jìn)行劃線純化，下列敘述合理的是____。

a．為保證無菌操作，接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌

b．挑取菌落時，應(yīng)挑取多個菌落，分別測定酵母細(xì)胞中甲醇的含量

c．劃線時不能劃破培養(yǎng)基表面，以確保能正常形成菌落

d．第二區(qū)以后的劃線起始端要與上一區(qū)的劃線的末端相連接，最后一區(qū)的劃線末端不能與第一區(qū)的劃線相連

（4）步驟⑤的培養(yǎng)中，應(yīng)加入 ___作為碳源，并加入適量的氮源、無機(jī)鹽和水等成分。為監(jiān)測發(fā)酵罐中酵母菌活細(xì)胞的密度，取2mL發(fā)酵液稀釋1000倍后，加入等體積臺盼藍(lán)染液染色，用如圖所示的計數(shù)室規(guī)格為25x16型的血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)，要達(dá)到每毫升4x109個活酵母菌細(xì)胞的預(yù)期密度，理論上，圖中標(biāo)號①～⑤五個中格里的呈____色的酵母菌細(xì)胞總數(shù)應(yīng)不少于____個。

【答案】pH 冷空氣 （壓力為）100kPa、（溫度為）121℃ 50℃ a、c、d 工業(yè)廢甲醇 無 40

【解析】

1、微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

2、分析題圖：①稱量土樣，里面含有需要分離的酵母菌；②表示梯度稀釋和涂布平板；③④表示平板劃線法，進(jìn)行純化培養(yǎng)；⑤表示擴(kuò)大培養(yǎng)，獲得更多的酵母菌。

（1）配制培養(yǎng)基時，按照培養(yǎng)基配方準(zhǔn)確稱量、溶化，調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，及時對培養(yǎng)基進(jìn)行分裝，高壓蒸汽滅菌。在加熱排除高壓鍋內(nèi)原有的冷空氣后，將高壓鍋密閉，繼續(xù)加熱，通常在（壓力為）100kPa、（溫度為）121℃的條件下，維持15-30min，可達(dá)到良好的滅菌效果。

（2）倒平板需要將培養(yǎng)基冷卻至50℃進(jìn)行。

（3）a、接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌，做到無菌操作，a正確；

b、挑取菌落時，應(yīng)挑取多個菌落，分別測定培養(yǎng)液中，而不是細(xì)胞內(nèi)甲醇的含量，b錯誤；

c、劃線時應(yīng)避免劃破培養(yǎng)基表面，否則大量酵母菌聚集，不能形成正常菌落，c正確；

d、第二區(qū)域以后的劃線區(qū)域的菌種來源于上一區(qū)域的末端，所以第二區(qū)以后的劃線起始端要與上一區(qū)的劃線的末端相連接，并且最后一區(qū)的劃線末端不能與第一區(qū)的劃線相連，d正確，以便于分離菌落。

故選acd。

（4）本實驗的目的是分離出可利用工業(yè)廢甲醇的酵母菌，所以應(yīng)該以甲醇作為碳源，活細(xì)胞膜具有選擇透過性，經(jīng)等體積臺盼藍(lán)染液染色，無色細(xì)胞才計數(shù)；為監(jiān)測酵母的活細(xì)胞密度，將發(fā)酵液稀釋1000倍后，經(jīng)等體積臺盼藍(lán)染液染色，用25×16型血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)5個中格中的細(xì)胞數(shù)，達(dá)到每毫升4×109個活細(xì)胞的預(yù)期密度，則n÷80×400÷（0.1×103）×2000=4×109，則5個中方格中無色酵母菌不少于40。

練習(xí)冊系列答案
相關(guān)習(xí)題

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【題目】研究發(fā)現(xiàn)，人體內(nèi)由色氨酸(分子式為C11H12N2O2)代謝生成的5-羥色胺作為一種神經(jīng)遞質(zhì)能抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮度，使人產(chǎn)生困倦感。據(jù)此分析下列說法正確的是（ ）

A.色氨酸的R基是-C9H9O

B.飲食中適量添加富含色氨酸的食物有利于睡眠

C.人體需要的色氨酸在體內(nèi)可以由其他物質(zhì)轉(zhuǎn)化而來

D.5-羥色胺在突觸前膜以主動運(yùn)輸方式進(jìn)入突觸間隙

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】C肽又稱連接肽，由胰島B細(xì)胞分泌，它與胰島素有一個共同的前體——胰島素原。1分子胰島素原經(jīng)蛋白酶的作用，分解為1分子胰島素和1分子C肽，同時釋放入血液中。如圖所示1分子胰島素原切去C肽形成胰島素的過程（圖中箭頭表示切點(diǎn)，數(shù)字表示氨基酸序號，-S-S-表示二硫鍵），據(jù)圖回答下列問題：

（1）胰島素是由____________個氨基酸組成的蛋白質(zhì)，至少含有____________個游離羧基。蛋白酶可以水解蛋白質(zhì)，而在胰島素形成過程中蛋白酶的作用是________________________。

（2）在臨床中，對于接受胰島素治療的患者，測定其血液中胰島素水平，不能評價自身胰島功能。可以通過測定C肽水平，來評價自身胰島B細(xì)胞的功能，其原因是________________________。

（3）胰島素功能主要是__________。臨床上低血糖原因可以分為兩種，一是胰島素分泌過多，二是其他原因。如何通過測定C肽水平米判斷低血糖原因，請加以說明：____________。

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【題目】為了增加菊花花色類型，研究者從其他植物中克隆出花色基因C（圖1），擬將其與Ti質(zhì)粒（圖2）重組，再借助農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花中。回答下列問題：

（1） PCR技術(shù)所用到的關(guān)鍵酶是__________，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，其目的是__________。

（2）圖1是花色基因C兩側(cè)被EcoR I酶切后所形成的末端結(jié)構(gòu)，請寫出EcoR I酶識別序列并標(biāo)出切點(diǎn)：__________（用“↓”表示切點(diǎn)位置）。圖2中EcoRI酶所識別的位點(diǎn)應(yīng)在Ti質(zhì)粒的__________片段上。

（3）將導(dǎo)人目的基因的菊花細(xì)胞培養(yǎng)成植株需要利用__________技術(shù)，其原理是__________。

（4）在個體生物學(xué)水平上，如何鑒定轉(zhuǎn)基因菊花培育是否成功？____________________

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【題目】2018年4月，（Reproductive BioMedicine ）期刊在線發(fā)表的一篇文章顯示，到2100 年，借助輔助生殖技術(shù)（即試管嬰兒技術(shù) ）誕生的人數(shù)可能將達(dá)到全球總?cè)肟诘?/span>3．5%---約4 億人。請回答下列問題：

（1）試管嬰兒技術(shù)是體外受精技術(shù) ________技術(shù)等人工助孕技術(shù)的俗稱。

（2）體外受精首先需采集卵子，成熟的卵子能與____________ 的精子結(jié)合，形成受精卵。受精卵發(fā)育成胎兒的大致過程是受精卵→_____→囊胚→ _____→組織器 官的分化。

（3）在體外培養(yǎng)受精卵時，除了給予一定量的O2以維持細(xì)胞呼吸外。還需要提供_______以維持培養(yǎng)液的正常pH。母體對移入子宮的外來胚胎____________，這為胚胎在母體內(nèi)存活提供了可能。

（4）借助于胚胎分割技術(shù)，理論上一次可以獲得多個胎兒，胚胎分割操作過程霄要特別注意的問題是將__________均等分裂。

（5）人也是生態(tài)系統(tǒng)的一員，要維持地球的和諧有序發(fā)展，我們必須關(guān)注生態(tài)工程建設(shè)。下列結(jié)構(gòu)示意圖最能體現(xiàn)生態(tài)工程中系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理的是______________。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】回答下列有關(guān)植物激素的問題。

（1）當(dāng)植物表現(xiàn)出頂端優(yōu)勢時，頂芽產(chǎn)生的生長素運(yùn)到相鄰側(cè)芽________(填“需要”或“不需要”)消耗ATP。

（2）某研究小組探究避光條件下生長素濃度對燕麥胚芽鞘生長的影響。胚芽鞘去頂靜置一段時間后，將含有不同濃度生長素的瓊脂塊分別放置在不同的去頂胚芽鞘一側(cè)，一段時間后測量并記錄彎曲角度(α)。下圖為實驗示意圖。

①α的范圍為________________(填180°≥α>0°、180°≥α≥90”或90°≥α>0)。

②在兩組實驗中若α相同，則瓊脂塊中含有生長素的濃度________(填一定或不一定)相同。

（3）有科學(xué)家認(rèn)為根的向地生長不僅與生長素有關(guān)，還與乙烯的作用有關(guān)。為了研究二者的關(guān)系，科研人員做了這樣的實驗：將某種開花植物的根尖放在含不同濃度生長素的培養(yǎng)液中，并加入少量蔗糖作為能源。發(fā)現(xiàn)在這些培養(yǎng)液中出現(xiàn)了乙烯，且生長素濃度越高，培養(yǎng)液中乙烯的濃度也越高，根尖生長所受的抑制也越強(qiáng)。此實驗設(shè)計不夠嚴(yán)謹(jǐn)，該如何改進(jìn)？______________________________________________。據(jù)此實驗結(jié)果，推斷水平放置的植物其根向重力生長的原因是______________________________________。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】甲狀腺激素（TH）是一種對動物的生長、發(fā)育有促進(jìn)作用的激素。如圖為TH分泌的調(diào)節(jié)示意圖。某興趣小組為了探究圖中虛線所示情況是否存在，進(jìn)行了相關(guān)實驗。該小組設(shè)計的實驗組和對照組較為合理的是（ ）

A.實驗組：切除垂體，注射適量的TSH；對照組：切除垂體，注射等量的生理鹽水

B.實驗組：切除甲狀腺，注射適量生理鹽水；對照組：切除甲狀腺，注射等量的TSH

C.實驗組：切除垂體，注射適量生理鹽水；對照組：不切除垂體，注射等量的TSH

D.實驗組：切除甲狀腺，注射適量的TSH；對照組：切除甲狀腺，注射等量生理鹽水

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】某研究小組從蛙的精巢中提取一些細(xì)胞，測定細(xì)胞中染色體數(shù)目(無突變發(fā)生)，將這些細(xì)胞分為三組，每組的細(xì)胞數(shù)如圖所示。從圖中所示結(jié)果分析，不正確的是（ ）

A.乙組細(xì)胞中有一部分可能正在進(jìn)行DNA的復(fù)制

B.丙組細(xì)胞中有一部分可能正在發(fā)生非同源染色體上的非等位基因的重新組合

C.乙組細(xì)胞中既有進(jìn)行有絲分裂的細(xì)胞也有進(jìn)行減數(shù)分裂的細(xì)胞

D.用藥物阻斷DNA復(fù)制會減少甲組細(xì)胞的生成

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】圖示HIV病毒侵入實驗動物體內(nèi)后一些生命活動過程，請回答下列問題：

（1）甲圖中以RNA為模板合成RNA-DNA結(jié)合物過程需要 _______酶。

（2）實驗動物體抗HIV抗體是由 ______細(xì)胞產(chǎn)生的，該抗體無法徹底清除HIV病毒，HIV病毒以T淋巴細(xì)胞為主要宿主細(xì)胞，據(jù)此解釋感染較長時間后動物體內(nèi)抗體水平下降的原因是 _______________________________________________________________，實驗動物感染HIV病毒后惡性腫瘤發(fā)病率顯著上升，是因為感染導(dǎo)致機(jī)體 ______ （免疫功能）缺失。

（3）不同傳染病的病原體不同，寫出一條確認(rèn)某微生物為該傳染病病原體的必要條件________，痊愈者血清能幫助重癥患者康復(fù)，起主要作用的成分是 ______。

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