Question

【題目】已知某傳染性疾病的病原體為 RNA 病毒，該病毒表面的 A 蛋白為主要抗原。疫苗的生產(chǎn)和抗體的制備流程如下圖所示。請回答下列問題：

（1）圖示①過程需要___________________________酶，圖示③為基因工程的核心步驟，其理論基礎(chǔ)是___________________________。

（2）若受體細(xì)胞為大腸桿菌，則④過程往往需用氯化鈣處理大腸桿菌，以增加其___________________________的通透性，使其處于感受態(tài)。為提高大腸桿菌轉(zhuǎn)化率，除了上述處理外，還可以通過___________________________ 來實(shí)現(xiàn)。

（3）本抗體制備流程示意圖中所需的 B 淋巴細(xì)胞往往須從___________________________的小鼠的脾細(xì)胞中選擇。⑤過程可用電刺激、聚乙二醇或___________________________介導(dǎo)實(shí)現(xiàn)細(xì)胞融合。

（4）圖示雜交細(xì)胞往往還需兩次___________________________進(jìn)行篩選，以便最終獲得既能分泌特異性抗體，又能無限增殖的雜交瘤細(xì)胞克隆。

（5）制備的單克隆抗體可作為___________________________，研究相應(yīng)抗原蛋白的結(jié)構(gòu)、細(xì)胞學(xué)分布及其功能。

Answer 1

【答案】逆轉(zhuǎn)錄 DNA 分子具有相同的結(jié)構(gòu) 細(xì)胞壁 提高重組 DNA 的濃度，增加大腸桿菌的濃度，保持適宜的溫度pH 等 經(jīng) A 蛋白刺激，發(fā)生免疫反應(yīng) 滅活的仙臺病毒（或仙臺病毒） 抗體檢驗(yàn) 特異探針

【解析】

圖示為疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一，其中①表示逆轉(zhuǎn)錄過程；②是獲取目的基因（A基因）的過程；③是基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；④是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過程；⑤是細(xì)胞融合過程；⑥是雜交瘤細(xì)胞擴(kuò)大培養(yǎng)的過程。

（1）由以上分析可知，①是逆轉(zhuǎn)錄過程，故需要逆轉(zhuǎn)錄酶；③是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，其理論基礎(chǔ)DNA 分子具有相同的結(jié)構(gòu)。

（2）用氯化鈣處理大腸桿菌，增加大腸桿菌細(xì)胞壁的通透性，使含有目的基因的重組質(zhì)粒進(jìn)入大腸桿菌宿主細(xì)胞；還可以通過提高重組 DNA 的濃度，增加大腸桿菌的濃度，保持適宜的溫度pH 等來提高大腸桿菌轉(zhuǎn)化率。

（3）制備單克隆抗體所用的B淋巴細(xì)胞往往是經(jīng)過抗原刺激發(fā)生免疫反應(yīng)的細(xì)胞，所以要從經(jīng) A 蛋白刺激、發(fā)生免疫反應(yīng)的小鼠脾細(xì)胞中選擇。動物細(xì)胞可以在滅火的仙臺病毒或聚乙二醇等物質(zhì)的介導(dǎo)下實(shí)現(xiàn)細(xì)胞融合。

（4）雜交后的細(xì)胞需要經(jīng)過培養(yǎng)和抗體檢驗(yàn)，才能獲得既能分泌特異性抗體，又能無限增殖的雜交瘤細(xì)胞克隆。

（5）單克隆抗體可以作為特異性探針用于研究相應(yīng)抗原蛋白的結(jié)構(gòu)、細(xì)胞學(xué)分布及其功能。