Question

【題目】酵母菌是對青霉素不敏感的異養(yǎng)型生物，種類繁多，給人類生活帶來了許多益處。回答問題：

（1）制作果酒過程中，除將溫度控制在____________外，往往還需要先通氣，后密封，酒精發(fā)酵的反應方程式是_____________。

（2）在工業(yè)發(fā)酵時，培養(yǎng)酵母菌的培養(yǎng)基中需要添加青霉素，目的是_____________。

（3）酵母菌生長需要適宜的pH，因此在培養(yǎng)基配制過程中需要添加pH緩沖劑以維持pH相對穩(wěn)定，原因是_____________。

（4）采用平板劃線法分離樣液中的酵母菌時，接種環(huán)需通過______________的方法滅菌，在第二次及以后劃線時，總是從上一次的末端開始劃線，這樣做是為了_____________。若經一段時間培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)有的線上長滿了菌落，有的線上無菌落，造成這種現(xiàn)象的原因可能是_____________（答出一項即可）。

Answer 1

【答案】18~25℃ +能量 抑制細菌等雜菌的生長 酵母菌培養(yǎng)過程中積累了大量代謝產物，導致pH下降 灼燒滅菌法 使聚集的菌體逐步減少，以便獲得單個酵母菌形成的菌落 劃線操作時接種環(huán)灼燒后未冷卻；未從上一次劃線末端開始劃線。

【解析】

1.微生物接種常用的兩種方法：

①平板劃線法：將已經熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過足夠稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經培養(yǎng)后，可形成單菌落。

2.果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧型生物，在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖，在無氧條件下，酵母菌進行酒精發(fā)酵。溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件，20℃左右，酒精發(fā)酵時，一般將溫度控制在18~25℃，在葡萄酒自然發(fā)酵過程當中，其主要作用的是附著在葡萄皮上的野生酵母菌。

（1）由分析可知：制作果酒過程中，除將溫度控制在18~25℃外，往往還需要先通氣，目的是讓酵母菌在有氧的條件下大量繁殖，而后密封是為了創(chuàng)造無氧條件，讓酵母菌進行無氧呼吸，酒精發(fā)酵的反應方程式是：+能量

（2）在工業(yè)發(fā)酵時，培養(yǎng)酵母菌的培養(yǎng)基中需要添加青霉素，目的是抑制細菌等雜菌的生長，保證酵母菌的更好的發(fā)酵條件。

（3）酵母菌生長需要適宜的pH，酵母菌培養(yǎng)過程中積累了大量代謝產物，導致pH下降，從而影響到酵母菌的生長，因此在培養(yǎng)基配制過程中需要添加pH緩沖劑以維持pH相對穩(wěn)定。

（4）采用平板劃線法分離樣液中的酵母菌時，接種環(huán)需通過灼燒滅菌法進行滅菌；平板劃線操作的目的是為了通過多次劃線延伸，使菌種數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。因此在劃線操作中從第二次及以后劃線時，總是從上一次的末端開始劃線，這樣做使聚集的菌體逐步減少，以便獲得單個酵母菌形成的菌落。劃線操作過程中，每次灼燒接種環(huán)后必須冷卻后再進行劃線，如果劃線操作時接種環(huán)灼燒后未冷卻或未從上一次劃線末端開始劃線，會導致有的線上長滿了菌落，有的線上無菌落的現(xiàn)象。