Question

【題目】研究表明，HER2/neu是一種原癌基因，它表達的H蛋白在多種惡性腫瘤特別是乳腺癌細胞中過量表達�？笻蛋白單克隆抗體能抑制過量表達H蛋白的乳腺癌細胞的生長，目前已成為有效的生物治療手段。

（1）選擇H蛋白作為單克隆抗體的作用靶點，是因為H蛋白在成年個體的正常組織中_____（填“低表達”或“高表達”）。H蛋白是一個跨膜蛋白，結構如圖所示。制備免疫小鼠用的H蛋白（抗原）時，應構建____________區(qū)基因，轉入原核細胞表達并提純。

（2）將H蛋白注射到小鼠體內，取該小鼠的脾臟細胞與______________細胞進行融合，使用的化學誘導劑是_____________，細胞融合的原理是______________________。

（3）將融合細胞在_________________培養(yǎng)基中培養(yǎng)，一段時間后培養(yǎng)基中只有雜交瘤細胞生長。將雜交瘤細胞轉到多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，吸取有克隆生長的細胞培養(yǎng)液中的__________（填“上清液”或“沉淀細胞”），應用_____________技術進行抗體陽性檢測。經多次篩選，就能得到產生單克隆抗體的雜交瘤細胞。

（4）將篩選得到的雜交瘤細胞，經過______________或小鼠腹腔內培養(yǎng)，獲取大量的單克隆抗體。

（5）治療乳腺癌時，可單獨使用抗H蛋白單克隆抗體，也可將該單克隆抗體與抗癌藥物結合構建“生物導彈”，殺死癌細胞。這充分體現了單克隆抗體____________的特點。

Answer 1

【答案】（1）低表達 胞外

（2）骨髓瘤 PEG（或聚乙二醇） 細胞膜的流動性

（3）選擇 上清液 抗原—抗體雜交

（4）體外（培養(yǎng)）

（5）特異性強（或識別抗原部位專一）

【解析】

試題分析：（1）H蛋白在成年個體的正常組織中低表達，選擇H蛋白作為單克隆抗體的作用靶點，既能抑制癌細胞生長，又對正常組織細胞影響較小。由于H蛋白是一個跨膜蛋白，只要選擇胞外區(qū)的基因進行構建，轉入原核細胞表達并提純即可獲得相應抗原。

（2）取經H蛋白處理的小鼠脾臟細胞與骨髓瘤細胞進行融合，化學誘導劑通常使用PEG，細胞融合的原理是細胞膜的流動性。

（3）融合細胞需要用選擇培養(yǎng)基篩選出既能分泌抗體又能無限增殖的雜交瘤細胞。利用抗原—抗體雜交技術來確定克隆生長的細胞培養(yǎng)孔中的上清液中是否含有相應的抗體。

（4）培養(yǎng)雜交瘤細胞的方法有體外培養(yǎng)和小鼠腹腔內培養(yǎng)。

（5）單克隆抗體具有特異性強的特點