Question

【題目】如圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線．圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因，ampR表示氨芐青霉素抗性基因，BamHI、HindIII、SmaI指示線所示為三種限制酶的酶切位點(diǎn)．
據(jù)圖回答：
（1）圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用限制酶 ， 同時(shí)酶切載體和人乳鐵蛋白基因．篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含的培養(yǎng)基上進(jìn)行．
（2）能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列（ ）（填字母代號(hào)）
A.啟動(dòng)子
B.tetR
C.復(fù)制原點(diǎn)
D.ampR
（3）過程①可采用的操作方法是（ ）（填字母代號(hào)）
A.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化
B.大腸桿菌轉(zhuǎn)化
C.顯微注射
D.細(xì)胞融合
（4）為檢測人乳鐵蛋白是否成功表達(dá)，可采用（ ）（填字母代號(hào)）技術(shù)．
A.核酸分子雜交
B.基因序列分析
C.抗原﹣抗體雜交
D.PCR
（5）基因工程的四個(gè)基本操作步驟是、、和 ．

Answer 1

【答案】
（1）HindⅢ和BamHⅠ；氨芐青霉素
（2）A
（3）C
（4）C
（5）獲取目的基因；基因表達(dá)載體的構(gòu)建；將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；目的基因的檢測與鑒定
【解析】解：（1）外源DNA分子上含有限制酶BamHI、HindIII、SmaI的切割位點(diǎn)，其中限制酶SmaI的切割位點(diǎn)位于目的基因上，所以獲取目的基因和構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)用限制酶HindⅢ和BamHⅠ．用限制酶HindⅢ和BamHⅠ切割質(zhì)粒后，會(huì)破壞質(zhì)粒上的四環(huán)素抗性基因，但不會(huì)破壞氨芐青霉素抗性基因，因此篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進(jìn)行．（2）啟動(dòng)子是能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列．（3）過程①是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞，當(dāng)受體細(xì)胞是動(dòng)物細(xì)胞時(shí)，將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法．（4）為檢測人乳鐵蛋白是否成功表達(dá)，可采用抗原﹣抗體雜交技術(shù)．（5）基因工程的操作步驟為：獲取目的基因、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因的檢測與鑒定． 所以答案是：（1）HindⅢ和BamHⅠ；氨芐青霉素；（2）A；（3）C；（4）C；（5）獲取目的基因；基因表達(dá)載體的構(gòu)建；將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；目的基因的檢測與鑒定
【考點(diǎn)精析】認(rèn)真審題，首先需要了解基因工程的原理及技術(shù)(基因工程的原理是利用DNA重組技術(shù))．