Question

【題目】我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬在東北農(nóng)業(yè)大學(xué)的種豬場自然分娩產(chǎn)出，這標(biāo)志著我國在轉(zhuǎn)基因克隆豬技術(shù)領(lǐng)域已達(dá)到世界領(lǐng)先水平。下圖為我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖，請據(jù)圖回答：

（1）一個(gè)完整的基因表達(dá)載體除了帶有綠色熒光蛋白基因以外，還必須含有復(fù)制原點(diǎn)、啟動子、終止子和________________。啟動子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，它是___________酶識別和結(jié)合的部位；而起始密碼子的化學(xué)本質(zhì)則是________（DNA或RNA）。

（2）過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞后，要通過DNA分子雜交技術(shù)，來檢測綠色熒光蛋白基因是否已重組到豬胎兒成纖維細(xì)胞的__________________上。

（3）從豬中取胎兒成纖維細(xì)胞，用__________________處理，然后進(jìn)行分散培養(yǎng)。培養(yǎng)時(shí)，將培養(yǎng)瓶置于含一定量CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，CO2的作用是_____________。

（4）過程④表示通過顯微操作法吸出卵母細(xì)胞中的細(xì)胞核，微型吸管除了將細(xì)胞核吸除外，往往還要將__________________一并吸出。

（5）本實(shí)驗(yàn)所用到的現(xiàn)代生物科學(xué)技術(shù)有____________________________（填序號）。

A.動物細(xì)胞培養(yǎng) B.胚胎移植

C.胚胎細(xì)胞核移植 D.DNA重組技術(shù)

Answer 1

【答案】 標(biāo)記基因 RNA聚合 RNA 染色體DNA 胰蛋白酶（或膠原蛋白酶） 維持培養(yǎng)液的pH 第一極體 ABD

【解析】試題分析：據(jù)圖分析，①表示獲取綠色熒光蛋白基因，②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，③表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，④表示去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核，⑤表示核移植，⑥表示早期胚胎的培養(yǎng)，⑦表示胚胎移植，⑧表示妊娠分娩獲得綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬。

（1）基因表達(dá)載體含有綠色熒光蛋白基因（目的基因），啟動子、終止子和標(biāo)記基因，其中啟動子是RNA聚合識別和結(jié)合的部位，啟動轉(zhuǎn)錄；由于終止密碼在mRNA上，所以其本質(zhì)是RNA。

（2）目的基因（reAnti基因）是否已重組到豬胎兒成纖維細(xì)胞的染色體上，可用DNA分子雜交技術(shù)進(jìn)行檢測。

（3）動物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理動物組織，使動物細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞．動物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)要放入到95%的空氣（保證細(xì)胞代謝）和5%CO2（調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的PH）培養(yǎng)箱中。

（4）過程④表示通過顯微操作法吸出卵母細(xì)胞中的細(xì)胞核，微型吸管除了將細(xì)胞核吸除外，往往還要將極體一并吸出。

（5）綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程涉及到的現(xiàn)代生物技術(shù)有動物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植、胚胎細(xì)胞核移植等。