【題目】pBV220載體是我國(guó)預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院病毒研究所自行構(gòu)建并廣泛應(yīng)用的大腸桿菌溫控載體,大小為3 666 bp(bp表示堿基對(duì)),其結(jié)構(gòu)如下圖所示。圖中PRPL是啟動(dòng)子,rrB是基因轉(zhuǎn)錄終止信號(hào),Ampr是氨芐抗性基因,ori是質(zhì)粒復(fù)制起點(diǎn),EcoR Ⅰ、Hind Ⅲ等為各種限制性內(nèi)切酶。請(qǐng)據(jù)圖回答下列有關(guān)問(wèn)題:
(1)基因工程的核心步驟是____________________________________。
(2)從圖中可看出,pBV220作為運(yùn)載體具備的條件有________、________。
(3)該質(zhì)?杀籄、B、C三種限制性內(nèi)切酶同時(shí)切割。單獨(dú)A切割得一條長(zhǎng)鏈,單獨(dú)B切也得一條長(zhǎng)鏈,A和C同時(shí)切割得2個(gè)500 bp和1個(gè)2 666 bp片段,B和C同時(shí)切割得2個(gè)250 bp和1個(gè)3 166 bp片段。若以A的切割位點(diǎn)為計(jì)算起點(diǎn),則B的切割位點(diǎn)與A點(diǎn)最短長(zhǎng)度為________,C的兩個(gè)切割位點(diǎn)與A點(diǎn)的最短距離分別為________、________
(4)PR和PL都是啟動(dòng)子,pBV220載體構(gòu)建過(guò)程中把兩個(gè)啟動(dòng)子串聯(lián)在一起,形成了雙啟動(dòng)子,雙啟動(dòng)子的作用可能是________。溫控基因CIts857編碼對(duì)溫度敏感的CIts蛋白,CIts在30℃時(shí)具有抑制啟動(dòng)子的活性,在42℃時(shí)失活。促進(jìn)工程菌目的基因表達(dá)的誘導(dǎo)溫度為________。
【答案】 構(gòu)建目的基因的表達(dá)載體 多個(gè)限制性內(nèi)切酶的切割位點(diǎn) 標(biāo)記基因 750 bp 500 bp 1 000 bp 保證目的基因的高水平表達(dá)(高效轉(zhuǎn)錄) 42℃
【解析】本題考查基因工程,要求考生理解基因工程的操作程序,明確運(yùn)載體必需具備的條件,能根據(jù)題意計(jì)算質(zhì)粒中的不同的酶切位點(diǎn)的位置關(guān)系,進(jìn)而分析、解答問(wèn)題。
(1)基因工程的核心步驟是構(gòu)建目的基因的表達(dá)載體。
(2)從圖中可看出,pBV220作為運(yùn)載體具備的條件有多個(gè)限制性內(nèi)切酶的切割位點(diǎn)(便于目的基因的插入)、具有標(biāo)記基因即氨芐抗性基因Ampr(便于鑒定和篩選含有目的基因的受體細(xì)胞)。
(3)單獨(dú)A切割得一條長(zhǎng)鏈,單獨(dú)B切也得一條長(zhǎng)鏈,A和C同時(shí)切割得2個(gè)500bp和1個(gè)2666bp片段,B和C同時(shí)切割得2個(gè)250bp和1個(gè)3166bp片段,這說(shuō)明該質(zhì)粒上有一個(gè)A酶切割位點(diǎn)、一個(gè)B酶切割位點(diǎn)、2個(gè)C酶切割位點(diǎn);A和C同時(shí)切割得2個(gè)500bp和1個(gè)2666bp片段,說(shuō)明A和C酶的一個(gè)切點(diǎn)之間的長(zhǎng)度為500bp;B和C同時(shí)切割得2個(gè)250bp和1個(gè)3166bp片段,說(shuō)明B和C酶的一個(gè)切點(diǎn)之間的長(zhǎng)度為250bp;若以A的切割位點(diǎn)為計(jì)算起點(diǎn),則B的切割位點(diǎn)與A點(diǎn)最短長(zhǎng)度為500+250=750bp,C的兩個(gè)切割位點(diǎn)與A點(diǎn)的最距離分別為500bp、1000bp。
(4)PR和PL都是啟動(dòng)子,pBV220載體構(gòu)建過(guò)程中把兩個(gè)啟動(dòng)子串聯(lián)在一起,形成了雙啟動(dòng)子,雙啟動(dòng)子的作用可能是保證目的基因的高水平表達(dá)(高效轉(zhuǎn)錄);溫控基因CIts857編碼對(duì)溫度敏感的CIts蛋白,CIts在30℃時(shí)具有抑制啟動(dòng)子的活性,在42℃時(shí)失活,因此要促進(jìn)工程菌目的基因表達(dá)就要使CIts蛋白失活,即促進(jìn)工程菌目的基因表達(dá)的誘導(dǎo)溫度為42℃。
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】一個(gè)完整的生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)應(yīng)包括( )
A.全部的食物鏈和食物網(wǎng)
B.生產(chǎn)者、消費(fèi)者、分解者和食物網(wǎng)
C.非生物的物質(zhì)和能量、生產(chǎn)者、消費(fèi)者、分解者
D.生態(tài)系統(tǒng)的組成成分,食物鏈和食物網(wǎng)
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】下圖是免疫細(xì)胞之間相互作用的部分模式圖,相關(guān)描述正確的是
A. 圖中有3種細(xì)胞能夠?qū)Σ【M(jìn)行特異性識(shí)別
B. 物質(zhì)I具有促進(jìn)細(xì)胞D增殖分化的作用
C. 物質(zhì)I和物質(zhì)Ⅱ都屬于免疫活性物質(zhì)
D. 細(xì)胞B和C在體液免疫和細(xì)胞免疫中都發(fā)揮作用
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】如圖所示的四個(gè)方框代表乳酸菌、衣藻、蘑菇和藍(lán)藻,其中陰影部分表示它們都具有的某種物質(zhì)或結(jié)構(gòu).下列物質(zhì)或結(jié)構(gòu)不可能出現(xiàn)在陰影部分中的是( )
A.RNA
B.染色體
C.DNA
D.核糖體
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】四川大地震中形成了幾十個(gè)堰塞湖,今后堰塞湖的演替屬于
A. 初生演替 B. 先是初生演替,后為次生演替
C. 次生演替 D. 先是次生演替,后為初生演替
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】在漁業(yè)生產(chǎn)中,要嚴(yán)格控制漁網(wǎng)網(wǎng)眼的大小以保護(hù)魚(yú)苗,這將會(huì)使被捕撈后種群的年齡組成為 ( )
A.增長(zhǎng)型 B.穩(wěn)定型 C.衰退型 D.無(wú)法判斷
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】如圖為某家族某種病的遺傳系譜圖(基因用E、e表示),據(jù)圖回答:
(1)據(jù)圖分析該病的遺傳方式為 ______________。
(2)Ⅱ3與Ⅱ4婚配的后代出現(xiàn)了患病個(gè)體,這種現(xiàn)象在遺傳學(xué)上稱為____________。
(3)Ⅲ7的基因型是______;系譜圖中的個(gè)體一定為雜合子有____________________。
(4)用B、b表示紅綠色盲基因,若Ⅲ8色覺(jué)正常,他與一個(gè)基因型為EeXBXb女性結(jié)婚,產(chǎn)生一個(gè)患兩種病孩子的概率是______________。
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】如圖是根據(jù)細(xì)胞器的相似點(diǎn)或不同點(diǎn)進(jìn)行分類的,下列選項(xiàng)中不是此圖分類依據(jù)的是( )
A.是否與能量轉(zhuǎn)換有關(guān)
B.有無(wú)雙層膜結(jié)構(gòu)
C.是否含有色素
D.有無(wú)膜結(jié)構(gòu)
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】為驗(yàn)證甲狀腺激素具有促進(jìn)個(gè)體發(fā)育的功能,某實(shí)驗(yàn)小組的同學(xué)將一正常幼年家兔的甲狀腺摘除并縫合后進(jìn)行觀察。對(duì)照組應(yīng)設(shè)為 ( )
A.用一成年的家兔做相同的實(shí)驗(yàn)
B.用一相似的幼年家兔在相同的環(huán)境中觀察
C.用一相似的幼年家兔在頸部切開(kāi)傷口后縫合,在相同的環(huán)境中觀察
D.用另一相似的幼年家兔做相同實(shí)驗(yàn),外源補(bǔ)充甲狀腺激素并在相同的環(huán)境中觀察
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