Question

【題目】某生物興趣小組在“蛋白質(zhì)的提取和分離”實驗中，準(zhǔn)備從豬的血液中初步提取血紅蛋白，設(shè)計的“血紅蛋白提取、分離流程圖”如下：

請回答下列有關(guān)問題：

（1）樣品處理中紅細(xì)胞的洗滌要用________反復(fù)沖洗、離心。向紅細(xì)胞懸液中加入一定量的低濃度pH＝7．0的緩沖液并充分?jǐn)嚢瑁�可以破碎紅細(xì)胞，破碎細(xì)胞的原理是________。

（2）血紅蛋白粗分離階段，透析的目的是____________，若要盡快達到理想的透析效果，可以________________________（寫出一種方法）。

（3）電泳利用了待分離樣品中各種分子的______________________________等的差異，而產(chǎn)生不同遷移速度，實現(xiàn)各種分子的分離。

（4）一同學(xué)通過血紅蛋白醋酸纖維薄膜電泳，觀察到正常人和鐮刀型細(xì)胞貧血癥患者的血紅蛋白電泳結(jié)果如圖所示。由圖可知攜帶者有_____種血紅蛋白，從分子遺傳學(xué)的角度作出的解釋是__________________________。

Answer 1

【答案】生理鹽水 滲透原理（當(dāng)外界溶液濃度低于動物細(xì)胞內(nèi)液濃度時，細(xì)胞吸水漲破） 除去小分子雜質(zhì) 增加緩沖液的量或及時更換緩沖液 帶電性質(zhì)以及分子大小、形狀 2 攜帶者具有（控制血紅蛋白的）一對等位基因，可以控制合成兩種不同的蛋白質(zhì)

【解析】

1、血紅蛋白的提取與分離的實驗步驟主要有：（1）樣品處理：①紅細(xì)胞的洗滌，②血紅蛋白的釋放，③分離血紅蛋白溶液。（2）粗分離：①分離血紅蛋白溶液，②透析。（3）純化：調(diào)節(jié)緩沖液面→加入蛋白質(zhì)樣品→調(diào)節(jié)緩沖液面→洗脫→收集分裝蛋白質(zhì)。（4）純度鑒定--SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。
2、電泳法是利用待測樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異和分子本身的大小、形狀不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實現(xiàn)樣品中各種分子的分離或鑒定。

（1）樣洗滌紅細(xì)胞可以用生理鹽水。向紅細(xì)胞懸液中加入一定量的低濃度pH=7.0的緩沖液并充分?jǐn)嚢瑁�可以破碎紅細(xì)胞，其原理是滲透原理（當(dāng)外界溶液濃度低于動物細(xì)胞內(nèi)液濃度時，細(xì)胞吸水漲破）。
（2）透析的目的是除去小分子雜質(zhì)；若要盡快達到理想的透析效果，可以增加緩沖液的量或及時更換緩沖液。
（3）電泳利用了待分離樣品中各種分子的帶電性質(zhì)以及分子大小、形狀等的差異，而產(chǎn)生不同遷移速度，實現(xiàn)各種分子的分離。
（4）由圖可知攜帶者有2種血紅蛋白，原因是攜帶者具有（控制血紅蛋白的）一對等位基因，可以控制合成兩種不同的蛋白質(zhì)。