下列關于基因工程的說法正確的是
A.基因工程的核心是將重組DNA分子導入受體細胞中
B.利用受體細胞克隆出大量的目的基因也屬于基因工程的范疇
C.DNA連接酶的作用是將2個DNA分子片段的互補堿基連接起來
D.構建重組DNA的質粒上有四環(huán)素的抗性基因,若受體細胞能在有四環(huán)素的培養(yǎng)基中生長,說明該受體細胞中一定含有目的基因
科目:高中生物 來源:上海市十三校2012屆高三第二次聯(lián)考生物試題 題型:071
回答下列關于基因工程的相關問題。
質粒是基因工程中的一種常用的工具之一,經(jīng)修飾改造后的質粒如下圖七一1所示。PUC118上的Lacz基因編碼β半乳糖苷酶的一條多肽鏈,其表達產(chǎn)物與菌落顏色有關;經(jīng)“修飾”后的“多克隆位點”位于LacZ基因之中。AmpR是抗氮卞青霉素基因。
1.PUC118上的基因AmpR作用的是:________“多克隆位點”中含有多種限制酶的識別序列,如HindⅢ,其切割后產(chǎn)生的DNA片斷中含有的部分序列是,則限制酶HindⅢ的識別序列是________。
2.圖2示意將目的基因導入大腸桿菌的操作步驟。其中,I~V表示操作過程;A-F表示使用的相關工其,其中的E1和E2表示有關的酶。試問:E2應是________(酶);經(jīng)過E2的切割,供體染色體中的DNA片段中游離的磷酸基團總數(shù)的變化是:________。
在策略上,圖1中的“多克隆位點”包含了多種、多個識別序列,請說出設計這種“多克隆位點”的目的:________。
3.LacZ基因可以使細菌在含有X-gttl(5-溴-4-氯-3-吲哚-B-D-半乳糖)底物和IPTG(一種乳糖類似物)的培養(yǎng)基上形成藍色的菌落,即X-gal被lacZ基因編碼產(chǎn)生的鼻半乳糖昔酶水解成藍色;若要形成重組質粒,則在含X-gal的培養(yǎng)基上將形成白色菌落(而不是藍色的)。
請據(jù)圖2分析下列問題:
①用本無PUC118的大腸桿菌作為受體細胞,將培養(yǎng)瓶C中被連接處理后的DNA混合物傾入含X-gal、IPTG和________的D培養(yǎng)基平板上,其目的是________。
菌落生長結果圖2中所示。
②過程V進行轉移培養(yǎng),則該應該挑選X、Y、Z中的________菌落進行液體培養(yǎng)。形成該顏色的生理原因是________。如此目的基因便被克隆了!
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