Question

【題目】如圖是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的過程。

（1）用_____（方法）對(duì)制備的培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，倒平板要待平板冷凝后，將平板倒置，其主要原因是______________________。

（2）圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以_____為唯一氮源，鑒別培養(yǎng)基還需添加_____作指示劑。

（3）在5個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為 105的土壤樣品溶液0．1mL，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長(zhǎng)出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178 和 191。該過程采取的接種方法是______，每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為______×108個(gè)；與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法相比，此計(jì)數(shù)方法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)較_____。

Answer 1

【答案】高壓蒸汽滅菌法 防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，避免培養(yǎng)基中的水分過快地?fù)]發(fā) 尿素 酚紅 稀釋涂布平板法 1．75 少

【解析】

微生物常見的接種的方法①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

（1）對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌的方法是高壓蒸汽滅菌，倒平板要待平板冷凝后，為防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，避免培養(yǎng)基中的水分過快地?fù)]發(fā)，應(yīng)將平板倒置培養(yǎng)。
（2）篩選尿素分解菌，應(yīng)在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，鑒別培養(yǎng)基還需添加酚紅作指示劑，產(chǎn)脲酶細(xì)菌在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)一段時(shí)間后，其菌落周圍的指示劑將變成紅色。
（3）接種微生物常用稀釋涂布平板法和平板劃線法，其中稀釋涂布平板法能對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)，因此若要估算試管中菌種的數(shù)量，除了采用顯微鏡直接計(jì)數(shù)的方法外，還可采用稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)；在5個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤溶液0.1mL，培養(yǎng)一段時(shí)間后，平板上長(zhǎng)出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為156、178、191三個(gè)平板符合計(jì)數(shù)要求，所以每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量=（156+178+191）÷3÷0.1×105=1.75×108個(gè)，血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)獲得的細(xì)菌數(shù)目包含了死菌和活菌，而稀釋涂布平板法測(cè)的是活菌數(shù)目，故與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法相比，稀釋涂布平板法測(cè)得的細(xì)菌數(shù)較少。