Question

【題目】下圖為利用人成纖維細胞(具分裂能力、能在HAT培養(yǎng)基上存活)和小鼠骨髓瘤細胞(具分裂能力、不能在HAT培養(yǎng)基上存活)進行人類基因定位的操作示意圖，請回答相關問題：

(1)圖示方法是____________技術的應用，該技術的基礎是__________技術。

(2)操作所用的成纖維細胞應傳代_____代以內，誘導融合時需要加入的化學促融劑是______。

(3)人、鼠細胞先經(jīng)過細胞膜融合形成______細胞，再經(jīng)過一次________，形成單核細胞。

(4)HAT培養(yǎng)基起_______培養(yǎng)作用，培養(yǎng)時溫度應為_____°C，操作中加入烏本苷的目的是_________。

(5)下表所示為雜交細胞A、B、C中存在的人類染色體及人類特有的4種酶（“十”表示存在，“一”表示不存在），這4種酶均為單基因編碼產(chǎn)生，據(jù)表判斷，編碼_______酶的基因位于染色體2上。

Answer 1

【答案】 )動物細胞融合 動物細胞培養(yǎng) 10 PEG 多核 有絲分裂 選擇 36.5±0.5 除去成纖維細胞 m和p

【解析】試題分析：分析題圖，圖示為利用人成纖維細胞（具分裂能力、能在HAT培養(yǎng)基上存活）和小鼠骨髓瘤細胞（具分裂能力、不能在HAT培養(yǎng)基上存活）進行人類基因定位的操作示意圖，成纖維細胞和小鼠骨髓瘤細胞在促融劑的作用下形成三種雜交細胞，即成纖維細胞自身融合細胞、小鼠骨髓瘤細胞自身融合的細胞和雜交細胞；在HAT培養(yǎng)基上篩選出成纖維細胞自身融合細胞和雜交細胞；加人鳥本苷的目的是除去成纖維細胞，留下雜交細胞。

（1）由圖分析，該過程為動物細胞融合，其基礎是動物細胞培養(yǎng)。

（2）目前使用的正常細胞通常為10代以內的，因為10代以內的細胞可以保持細胞正常的二倍體核型。誘導兩個動物細胞融合的方法：物理（離心、振動、電刺激）、化學（PEG）、生物誘導（滅活的病毒）。

（3）人、鼠細胞先經(jīng)過細胞膜融合形成多核細胞，經(jīng)過一次有絲分裂，形成單核細胞。

（4）據(jù)題干信息，人成纖維細胞能在HAT培養(yǎng)基上存活，而小鼠骨髓瘤細胞不能在HAT培養(yǎng)基上存活，則HAT培養(yǎng)基起選擇培養(yǎng)作用，篩選出人成纖維細胞和成纖維細胞融合的雜交細胞；動物細胞培養(yǎng)的適宜溫度為36.5±0.5℃；由圖可知，操作中加人鳥本苷的目的是除去成纖維細胞，篩選出雜交細胞。

（5）據(jù)表判斷，雜交細胞A中存在2和3號染色體，表達出酶m和p；雜交細胞B存在1和2號染色體，表達出酶n和q；說明編碼m和p酶的基因位于染色體2上。