Question

【題目】馬鈴薯塊莖含有大量的淀粉，富含多種維生素和無(wú)機(jī)鹽，我國(guó)已將馬鈴薯作為主糧產(chǎn)品進(jìn)行產(chǎn)業(yè)化開(kāi)發(fā)。下圖是轉(zhuǎn)基因抗鹽馬鈴薯的培育過(guò)程，請(qǐng)分析回答問(wèn)題：

（1）為獲取抗鹽基因，可以從堿蓬細(xì)胞研磨液中提取抗鹽基因的_________來(lái)合成cDNA。

（2）上圖構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，最好選用_________酶切割含目的基因的外源DNA和質(zhì)粒，不能使用Sma l切割的原因是_________________________________。構(gòu)建好的重組質(zhì)粒在抗鹽基因前要加上特殊的啟動(dòng)子，啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的_______片段。

（3）將基因表達(dá)載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA上的原因是________。通過(guò)農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，使抗鹽基因插入到馬鈴薯細(xì)胞中的染色體DNA上，從而使抗鹽基因的遺傳特性得以_________________。

（4）從個(gè)體水平上檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因抗鹽馬鈴薯是否培育成功的方法是___________________。

Answer 1

【答案】（每空1分，共7分）（1）mRNA

（2）EcoRⅠ和HindⅢ SmaⅠ會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因 DNA

（3）T-DNA是可以轉(zhuǎn)移的DNA 穩(wěn)定維持和表達(dá)

（4）將轉(zhuǎn)基因馬鈴薯幼苗栽種在鹽堿地或較高濃度鹽溶液中，觀察是否能正常生長(zhǎng)

【解析】（1）基因工程中，獲取目的基因時(shí)可以利用mRNA為模板，逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA。

（2）圖中質(zhì)粒的標(biāo)記基因?yàn)榭股�素抗性基因，�?/span>SmaI的切割位點(diǎn)就在該基因和目的基因上，因此用質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用SmaI切割，則應(yīng)該用EcoRⅠ和HindⅢ酶切割含目的基因的外源DNA和質(zhì)粒�；�因表達(dá)載體中啟動(dòng)子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段。

（3）農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA是可以轉(zhuǎn)移的DNA，可以將目的基因帶入馬鈴薯細(xì)胞，并將目的基因插入到馬鈴薯細(xì)胞中的染色體DNA上，從而使抗鹽基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)。

（4）檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因抗鹽馬鈴薯是否培育成功，從個(gè)體水平上來(lái)講，可以將轉(zhuǎn)基因馬鈴薯幼苗栽種在鹽堿地或較高濃度鹽溶液中，觀察是否能正常生長(zhǎng)。