【題目】(2016屆江蘇省四校高三5月聯(lián)考生物試卷)下面是將乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白基因HBsAg導(dǎo)入巴斯德畢赤酵母菌生產(chǎn)乙肝疫苗的過程及有關(guān)資料,請分析回答下列問題。
資料1 巴斯德畢赤酵母菌是一種甲基營養(yǎng)型酵母菌,能將甲醇作為其唯一碳源,此時AOX1基因受到誘導(dǎo)而表達[5'AOX1和3'AOX1(TT)分別是基因AOX1的啟動子和終止子]。
資料2 巴斯德畢赤酵母菌體內(nèi)無天然質(zhì)粒,所以科學(xué)家改造出了圖1所示的pPIC9K質(zhì)粒用作載體,其與目的基因形成的重組質(zhì)粒經(jīng)酶切后可以與酵母菌染色體發(fā)生同源重組,可以將目的基因整合于染色體中以實現(xiàn)表達。
(1)如果要將HBsAg基因和pPIC9K質(zhì)粒重組,應(yīng)該在HBsAg基因兩側(cè)的A和B位置接上 、 限制酶識別序列, 這樣設(shè)計的優(yōu)點是避免質(zhì)粒和目的基因自身環(huán)化。
(2)酶切獲取HBsAg基因后,需用 將其連接到pPIC9K質(zhì)粒上,形成重組質(zhì)粒,并將其導(dǎo)入大腸桿菌以獲取 。
(3)步驟3中應(yīng)選用限制酶 來切割重組質(zhì)粒獲得重組DNA,然后將其導(dǎo)入巴斯德畢赤酵母菌細胞。
(4)為了確認巴斯德畢赤酵母菌轉(zhuǎn)化是否成功,在培養(yǎng)基中應(yīng)該加入卡拉霉素以便篩選,轉(zhuǎn)化后的細胞中是否含有HBsAg基因,可以用 方法進行檢測。
(5)轉(zhuǎn)化的酵母菌在培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時間后,需要向其中加入 以維持其生活,同時誘導(dǎo)HBsAg基因表達。
(6)與大腸桿菌等細菌相比,用巴斯德畢赤酵母菌細胞作為基因工程的受體細胞,其優(yōu)點是在蛋白質(zhì)合成后,細胞可以對其進行 并分泌到細胞外,便于提取。
【答案】
(1)SnaBⅠ AvrⅡ (2)DNA連接酶 大量重組質(zhì)粒(重組質(zhì)粒不得分) (3)BglⅡ
(4)DNA分子雜交 (5)甲醇 (6)加工(修飾)
【解析】 (1) 重組質(zhì)粒上的目的基因若要表達,目的基因的首端和尾端需含有啟動子和終止子。而SnaBⅠ、AvrⅡ識別的序列在啟動子與終止子之間,只要在目的基因兩側(cè)的A和B位置分別接上這兩種序列,并用SnaBⅠ、AvrⅡ這兩種限制酶對質(zhì)粒和目的基因同時進行切割,便會各自出現(xiàn)相同的黏性末端,便于重組與表達,同時可防止自身環(huán)化,因此在HBsAg基因兩側(cè)的A和B位置應(yīng)接上SnaBⅠ和AvrⅡ限制酶的識別序列。
(2) 用DNA連接酶可將切割后的HBsAg基因和pPIC9K質(zhì)粒連接成重組質(zhì)粒;將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌體內(nèi)的目的是:利用大腸桿菌的無性繁殖,短時間內(nèi)獲取大量的重組質(zhì)粒。
(3) 重組DNA的兩側(cè)分別是啟動子和終止子,除BglⅡ外,其他限制酶均會破壞含有啟動子、終止子的目的基因。所以步驟3中應(yīng)選用限制酶BglⅡ來切割重組質(zhì)粒獲得重組DNA,然后將其導(dǎo)入巴斯德畢赤酵母菌細胞。
(4) 可用DNA分子雜交技術(shù)檢測巴斯德畢赤酵母菌內(nèi)是否導(dǎo)入了目的基因。
(5) 資料1顯示,甲醇為該酵母菌的唯一碳源,同時可誘導(dǎo)HBsAg基因表達,據(jù)此可知:轉(zhuǎn)化的酵母菌在培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時間后,需要向其中加入甲醇以維持其生活,同時誘導(dǎo)HBsAg基因表達。
(6) 大腸桿菌等細菌為原核生物,細胞內(nèi)沒有對分泌蛋白進行加工修飾的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,而巴斯德畢赤酵母菌為真核生物,其細胞內(nèi)有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體等復(fù)雜的細胞器。所以與大腸桿菌等細菌相比,用巴斯德畢赤酵母菌細胞作為基因工程的受體細胞,其優(yōu)點是在蛋白質(zhì)合成后,細胞可以對其進行加工修飾并分泌到細胞外,便于提取。
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【題目】為了探索海藻酸鈉固定化對綠球藻生長的影響,以及固定化藻對含Zn2+污水的凈化作用,科研人員用篩選到的一株綠球藻進行試驗,流程及結(jié)果如下。請回答下列問題:
(1)實驗中的海藻酸鈉作用是 ,CaC l2的作用是 。
(2)為洗去凝膠球上殘余的CaC l2和其他污染物,并保持綠球藻活性,宜采用 洗滌。圖1 中1. 0%海藻酸鈉組培養(yǎng)24 h 后,移去凝膠球,溶液呈綠色,原因是______________________。
(3)為探索固定化藻對含Zn2+污水的凈化作用,應(yīng)選用濃度為 海藻酸鈉制備凝膠球。
(4)圖2中空白凝膠球組Zn2+濃度下降的原因是 。結(jié)合圖1和圖2分析,固定化藻的實驗組24~48h間Zn2+濃度下降速度較快的主要原因是 ;72~96h間Zn2+濃度下降速度較慢的原因有 。
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【題目】圖甲是某二倍體動物在有性生殖和個體發(fā)育過程中細胞內(nèi)染色體數(shù)目變化曲線,圖乙是該種動物雌性個體中的—個細胞的染色體示意圖,請分析完成下列問題:(A、B、C表示生理過程,①-⑦表示時期,a和a'表示染色單體)
(1)受精卵是通過甲圖中的 (填字母)過程形成的。
(2)該動物細胞中姐妹染色單體分離可發(fā)生在有絲分裂后期和 期,同源染色體分離發(fā)生在 期。
(3)該動物的個體發(fā)育是通過細胞分裂和 過程實現(xiàn)的。
(4)乙圖所示細胞的形成場所是 。乙圖細胞所處的分裂時期屬于甲圖中 (填數(shù)字)階段;該動物的細胞中染色體數(shù)最多時有 條。
(5)若乙圖細胞中a上某位點的基因為H,a'上相應(yīng)位點的基因為h,產(chǎn)生此情況的根本原因是 的結(jié)果。乙圖細胞的分裂方式與其他細胞分裂方式相比較,其本質(zhì)區(qū)別在于子細胞 。
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【題目】下列有關(guān)生物進化的敘述錯誤的是
A.基因突變會導(dǎo)致種群基因頻率發(fā)生定向改變
B.遺傳可使有利變異逐代積累,對生物進化具有重要意義
C.物種的形成必須經(jīng)過種群間的隔離
D.不同物種之間、生物與無機環(huán)境之間存在共同進化
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【題目】摩爾根培養(yǎng)紅眼果蠅進行遺傳實驗,若干代后宊然現(xiàn)了1只白眼雄果蠅。這種變異來源于
A. 基因突變 B. 基因重組
C. 染色體數(shù)目變異 D. 染色體結(jié)構(gòu)變異
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【題目】下列有關(guān)自交和測交的敘述,正確的是
A. 自交可以純化顯性優(yōu)良品種
B. 測交不能用來驗證分離定律
C. 自交可以用來判斷某一顯性個體的基因型,測交不能
D. 測交可以用來判斷一對相對性狀的顯隱性,自交不能
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【題目】由圖中曲線a、b表示物質(zhì)跨膜運輸?shù)膬煞N方式,下列表述正確的是( )
A. 方式a離不開載體蛋白的協(xié)助
B. 脂溶性小分子物質(zhì)不能通過方式a運輸
C. 方式b的最大轉(zhuǎn)運速率與載體蛋白數(shù)量有關(guān)
D. 抑制細胞呼吸對方式a和b的轉(zhuǎn)運速率均有影響
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【題目】下列有關(guān)酶的敘述,錯誤的是( )
A. 所有酶都含有C、H、O、N元素
B. 產(chǎn)生激素的細胞都能產(chǎn)生酶
C. 酶不一定只在細胞內(nèi)起催化作用
D. 高溫、低溫都能破壞酶的空間結(jié)構(gòu)
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【題目】以下為某家族苯丙酮尿癥(設(shè)基因為B、b)和進行性肌營養(yǎng)不良。ㄔO(shè)基因為D、d)的遺傳家系圖,其中II4家族中沒有出現(xiàn)過進行性肌營養(yǎng)不良病。下列說法正確的是
A. 苯丙酮尿癥是常染色體隱性遺傳病,進行性肌營養(yǎng)不良病是伴X染色體顯性遺傳病
B. Ⅲ4的基因型是BbXDXd,II1和II3基因型不同
C. 若Ⅲ5的性染色體組成為XXY,那么產(chǎn)生異常生殖細胞的是其父親
D. 若Ⅲ1與一正常男人婚配,他們所生的孩子最好是女性,在父親基因型為Bb的情況下,該性別的孩子有可能患苯丙酮尿癥,概率為1/6
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