Question

【題目】“且就洞庭賒月色，將船買酒白云邊”。李白留下的這一膾炙人口的千古絕句經(jīng)常在中央電視臺播出。我市松滋特產(chǎn)、湖北名酒、譽(yù)滿全國的“白云邊酒”是以水、高粱、小麥為原料，通過固態(tài)發(fā)酵而成。大家公認(rèn)的環(huán)境中存在的獨(dú)特微生物是釀制其獨(dú)特品質(zhì)的關(guān)鍵因素之一。為了提取環(huán)境中的獨(dú)特菌種，某高中學(xué)校生物研究性學(xué)習(xí)小組以優(yōu)質(zhì)的高粱和小麥為原料，制作培養(yǎng)基，搜集、分離空氣中的微生物。請回答下列問題:

（1）該培養(yǎng)基在接種微生物前，必須先進(jìn)行___________________滅菌。

（2）將上述培養(yǎng)基暴露在空氣中培養(yǎng)一段時間后，取10g該培養(yǎng)基用無菌水制成100mL樣品溶液。再將樣品溶液稀釋104倍后，各取樣品溶液0. 1mL，在5個培養(yǎng)基平板上接種。培養(yǎng)一段時間后，平板上長出的微生物菌落數(shù)分別為13， 156， 462， 178和191。該過程采取的接種方法是____________。每克培養(yǎng)基樣品中的微生物數(shù)量是__________________個。

（3）與用血細(xì)胞計數(shù)板記數(shù)相比，該計數(shù)方法測得的微生物數(shù)目要低。其原因是_______。

（4）酉良酒的主要微生物將葡萄糖分解為酒精的酶存在于___________ 。其生產(chǎn)酒的總反應(yīng)式可表示為__________________________。

（5）為了研究發(fā)酵罐中釀酒微生物的生長情況，常要取樣統(tǒng)計分析，并測定pH。若某同學(xué)未將取樣的樣品貼上標(biāo)簽，那么，確定取樣樣品順序的主要依據(jù)是_______________。

Answer 1

【答案】高壓蒸汽 稀釋涂布平板法 1.75×108 死亡的微生物不能形成菌落 兩個或多個菌體連在一起時形成一個菌落 細(xì)胞質(zhì)基質(zhì) C6H12O62C2H5OH + 2CO2 + 少量能量 發(fā)酵液的pH

【解析】

1、用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)時，在每一個梯度濃度內(nèi)，至少要涂布3個平板，選擇菌落數(shù)在30～300的進(jìn)行記數(shù)，求其平均值，再通過計算得出土壤中細(xì)菌總數(shù)。

2、①酵母菌是一種單細(xì)胞真菌，在有氧和無氧的條件下都能生存，屬于兼性厭氧菌，因此便于用來研究細(xì)胞呼吸的不同方式。

②CO2可使澄清石灰水變混濁，也可使溴麝香草酚藍(lán)水溶液由藍(lán)變綠再變黃。根據(jù)石灰水混濁程度或溴麝香草酚藍(lán)水溶液變成黃色的時間長短，可以檢測酵母菌培養(yǎng)CO2的產(chǎn)生情況。

③橙色的重鉻酸鉀溶液，在酸性條件下與乙醇（酒精）發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，在酸性條件下，變成灰綠色。

（1）該培養(yǎng)基是以優(yōu)質(zhì)高粱、上等小麥為原料制作的，高粱和小麥等原料中各種成分含量未知，屬于天然培養(yǎng)基，培養(yǎng)基在接種微生物前，必須先進(jìn)行滅菌，對培養(yǎng)基一般使用高壓蒸汽滅菌。

（2）用于計數(shù)細(xì)菌菌落數(shù)的常用方法是稀釋涂布平板法，統(tǒng)計的菌落數(shù)應(yīng)介于30～300之間，故選擇細(xì)菌菌落數(shù)為156、178和191的平板計數(shù)。每克該土壤樣品中的菌落數(shù)對應(yīng)的應(yīng)該是每毫升菌液中的細(xì)菌數(shù)目，所以每克該土壤樣品中的菌落數(shù)為（156+178+191）÷3÷（10÷100）×105=1.75×108。

（3）由于死菌不能形成菌落以及兩個或多個菌體未分離形成一個菌落時，往往統(tǒng)計的是一個菌落，所以用此計數(shù)方法測得的細(xì)菌數(shù)較少。

（4）酵母菌是真菌生物，無氧呼吸產(chǎn)生酒精的過程在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中。故將葡萄糖分解為酒精的酶存在于細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中。其無氧呼吸生產(chǎn)酒精的總反應(yīng)式可表示為C6H12O62C2H5OH + 2CO2 + 少量能量。
（5）某同學(xué)未將取樣的樣品貼上標(biāo)簽，那么，確定取樣樣品順序的主要依據(jù)是發(fā)酵液的pH。