Question

通過動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的方法可以研究某種化學(xué)物質(zhì)是否能夠使染色體畸變，請(qǐng)你完成下列實(shí)驗(yàn)并回答有關(guān)問題。

實(shí)驗(yàn)原理：有毒物質(zhì)能誘導(dǎo)染色體畸變，根據(jù)發(fā)生染色體畸變細(xì)胞的數(shù)量（或其占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)），可判斷該化學(xué)物質(zhì)的致畸性的強(qiáng)弱。

材料、藥品、用具：活的小白鼠胚胎、某種化學(xué)物質(zhì)、某種酶液、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液、動(dòng)物細(xì)胞固定液、適宜濃度的龍膽紫溶液、生理鹽水、滅菌設(shè)備、滴管、培養(yǎng)皿、剪刀、錐形瓶、培養(yǎng)瓶、恒溫箱、載玻片、蓋玻片、顯微鏡等。

實(shí)驗(yàn)步驟：

（1）制備細(xì)胞懸浮液

把活的小白鼠胚胎放在培養(yǎng)皿中剪碎，轉(zhuǎn)入錐形瓶中，加入      酶液（寫出酶的具體名稱）處理，使胚胎組織離散成單個(gè)細(xì)胞，再加入動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液，制成細(xì)胞懸浮液。

（2）進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)

①取A、B二個(gè)潔凈的培養(yǎng)瓶，                        。②向A培養(yǎng)瓶中加入適量的該化學(xué)物質(zhì)并將培養(yǎng)瓶搖勻；向B瓶中加入                    。在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，由于動(dòng)物細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中貼壁生長具有              現(xiàn)象，所以細(xì)胞停止分裂增殖時(shí)，培養(yǎng)瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是             。

（3）制作臨時(shí)裝片

①細(xì)胞增殖到大約第8代左右時(shí)，同時(shí)從恒溫箱中取出二個(gè)培養(yǎng)瓶，再次將瓶內(nèi)動(dòng)物細(xì)胞處理成細(xì)胞懸浮液，加入動(dòng)物細(xì)胞固定液以便迅速殺死并固定細(xì)胞。

②靜置一段時(shí)間后，分別從各培養(yǎng)瓶底部吸取適量的細(xì)胞懸浮液，滴在與培養(yǎng)瓶有相同編號(hào)的載玻片的中央，           ，3~5min后，蓋上蓋玻片。

（4）鏡檢和統(tǒng)計(jì)

把臨時(shí)裝片放在顯微鏡下，先用低倍鏡后用高倍鏡，尋找處于        期的細(xì)胞。并與B組觀察結(jié)果作對(duì)比。

預(yù)期結(jié)果及相應(yīng)的結(jié)論（與B組相比較）

如果                ，則說明這種化學(xué)物質(zhì)致畸性很強(qiáng)；

如果                ，則說明這種化學(xué)物質(zhì)致畸性較弱；

如果                 ，則說明這種化學(xué)物質(zhì)沒有致畸性；

Answer 1

（1）胰蛋白 

（2）①（消毒滅菌），加入等量的細(xì)胞懸浮液

②等量生理鹽水  接觸抑制  單層（或一層）

（3）②用適宜濃度龍膽紫溶液染色

（4）細(xì)胞有絲分裂中

預(yù)期結(jié)果及相應(yīng)的結(jié)論：

染色體畸變的細(xì)胞數(shù)量（或占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)）很多

染色體畸變的細(xì)胞數(shù)量（或占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)）較少

染色體畸變的細(xì)胞數(shù)量（或占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)）幾乎沒有