Question

進行植物體細胞雜交，首先需要除去細胞壁�，F(xiàn)提供以下材料和用具：白色洋蔥鱗片葉，紫色洋蔥鱗片葉，適宜濃度的蔗糖液，纖維素酶和果膠酶，蒸餾水，鑷子，顯微鏡，載玻片，蓋玻片等。請你從中選取合適的材料配制成合理的細胞壁分解液，并設計出檢驗它除去細胞壁的方法步驟，預測和解釋實驗的結果。

（1）實驗步驟
①配制細胞壁分解液
選取____________________________________________配制成細胞壁分解液。這樣選取的理由是___________________________________________________________。?
②檢驗細胞壁分解液除去細胞壁的方法?
第一步：___________________________________________________________________
__________________________________________________________________。
第二步：用適宜濃度的蔗糖液替代細胞壁分解液，其他操作與實驗組裝片相同，制對照組裝片。?
第三步：___________________________________________________________。?

（2）實驗結果和解釋：_____________________________________________________
________________________________________________________________________________________________________________________________________。

Answer 1

（1）①適宜濃度的蔗糖液，加入適量的纖維素酶和果膠酶
纖維素酶和果膠酶能高效專一地水解細胞壁，適宜濃度的蔗糖液不會使原生質體過度吸水而脹破
②第一步：滴適量的細胞壁分解液在載玻片中央，用鑷子撕取一小塊紫色洋蔥鱗片葉表皮浸泡在其中,蓋上蓋玻片。一段時間后，制得實驗組裝片
第三步：在顯微鏡下觀察比較實驗組和對照組裝片

（2）實驗組裝片的洋蔥細胞呈分散的紫色球形，表明細胞壁已被分解掉。
對照組裝片的洋蔥細胞呈相互連接的紫色多邊形，表明細胞壁未被分解。

（1）制備分解液的目的是去除植物細胞壁，植物細胞壁的成分是纖維素和果膠，酶解去壁有專一性（一種酶只能催化水解一種反應或一類反應）故分解液應該含有纖維素酶和果膠酶。但同時還要考慮去壁后的原生質體吸水膨脹問題，所以纖維素酶和果膠酶在加入的同時，還要添加一定濃度的蔗糖液，以避免原生質體過度吸水而脹破。
（2）檢驗植物細胞壁是否去除的原理是看細胞的形態(tài)、相互連接的狀況是否改變。而檢驗的最簡便的方法是清水浸泡后顯微鏡觀察。
（3）細胞分散則說明細胞壁已經不存在（被溶解了）；細胞未分散（細胞壁還存在）。
試題屬于中等難度。