Question

【題目】下圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線。圖中tetR表示四環(huán)素 抗性基因，ampR表示氨芐青霉素抗性基因，直線所示為BamH I、HindⅢ、Sma I三種限制酶的酶切位點(diǎn)。據(jù)圖回答：

（1）圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用 限制酶同時(shí)切害繊體和人乳鐵蛋白基因。篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含 的培養(yǎng)基上進(jìn)行。能驅(qū)動(dòng)人乳鐵蛋白基因在牛的乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控因子是圖中的 。過(guò)程①采用的操作方法通常是 。

（2）過(guò)程②采用的生物技術(shù)是 ，對(duì)早期胚胎進(jìn)行切割，經(jīng)過(guò)程②可獲得多個(gè)新個(gè)體，進(jìn)行胚胎分割時(shí)，應(yīng)選擇發(fā)育良好，形態(tài)正常的 進(jìn)行分割，目前最常見(jiàn)的是經(jīng)分割產(chǎn)生的同卵 胎。

（3）對(duì)代孕牛的要求是 。

Answer 1

【答案】（1）HindⅢ,和BamHI 氨芐青霉素 啟動(dòng)子 顯微注射法

（2）胚胎移植 桑椹胚或囊胚 雙

（3）體質(zhì)健康且繁殖能力正常

【解析】

試題分析：（1）外源DNA分子上含有限制酶BamHI、HindIII、SmaI的切割位點(diǎn)，其中限制酶SmaI的切割位點(diǎn)位于目的基因上，所以獲取目的基因和構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)用限制酶HindⅢ和BamHⅠ。用限制酶HindⅢ和BamHⅠ切割質(zhì)粒后，會(huì)破壞質(zhì)粒上的四環(huán)素抗性基因，但不會(huì)破壞氨芐青霉素抗性基因，因此篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進(jìn)行。啟動(dòng)子是RNA聚合酶特異性識(shí)別和結(jié)合的DNA序列，是基因的一個(gè)組成部分，控制基因表達(dá)（轉(zhuǎn)錄）的起始時(shí)間和表達(dá)的程度。過(guò)程①是將重組質(zhì)粒導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞的過(guò)程，常用顯微注射法。

（2）過(guò)程②是將早期胚胎移入代孕牛的體內(nèi)，利用的是胚胎移植的技術(shù)。胚胎分割時(shí)應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚。

（3）代孕牛要有健康體質(zhì)和正常繁殖能力。