Question

【題目】某種熒光蛋白（GFP）在紫外光或藍光激發(fā)下會發(fā)出綠色熒光，這一特性可用于檢測細胞中目的基因的表達。某科研團隊將某種病毒的外殼蛋白（L1）基因與GFP基因連接獲得了L1-GFP融合基因（簡稱為甲），并將其插入質粒，構建了真核表達載體P1，其部分結構和酶切位點的示意圖如下，圖中E1~E4為四種限制酶。下列說法錯誤的是：

A. 據(jù)圖推斷，在將甲插入質粒時，使用了E1和E4兩種限制酶

B. GFP基因可以認為是標記基因

C. 將P1轉入體外培養(yǎng)的牛皮膚細胞，若在該細胞中觀察到了綠色熒光，則說明L1基因在牛的皮膚細胞中完成了轉錄和翻譯

D. 為了獲得含有甲的牛，需將能夠產生綠色熒光細胞的細胞核移入牛的正常卵細胞中、在進行體外培養(yǎng)、胚胎移植等

Answer 1

【答案】D

【解析】

對題圖進行分析可知，圖示為表達載體P1，含有啟動子、標記基因（GFP基因）、目的基因（LI基因）和終止子。

由題圖可知，E1~E4為四種限制酶，產生的黏性末端各不相同，LI–GFP融合基因兩側是限制酶E1、E4的酶切位點。在將甲插入質粒時，使用了E1和E4兩種限制酶，既保證了甲的完整，又防止了甲的自身環(huán)化，保證了甲與載體的正確連接，A正確；標記基因的作用是為了鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來。GFP基因可表達出熒光蛋白GFP，該熒光蛋白在紫外光或藍光激發(fā)下會發(fā)出綠色熒光，根據(jù)綠色熒光可以進行篩選，因此GFP基因是標記基因，B正確；將P1轉入體外培養(yǎng)的牛皮膚細胞后，若在該細胞中觀察到了綠色熒光，則說明該細胞中合成了熒光蛋白，進而說明目的基因（LI基因）已經表達，即在牛皮膚細胞中完成了遺傳信息的轉錄和翻譯過程，C正確；將能夠產生綠色熒光細胞的細胞核移入牛的去核的卵母細胞中，形成重組細胞，并促使其分裂發(fā)育為早期胚胎，再將早期胚胎植入代孕母牛的子宮中，由它孕育并產生含有甲的牛，D錯誤。因此，本題答案選D。