Question

【題目】Rag2基因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細(xì)胞�？蒲腥藛T利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對Rag2基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療。其技術(shù)流程如圖：

（1）①中在核移植前通常使用_______ 去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核

（2）步驟中，重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時(shí)，可從其_____分離出ES細(xì)胞中添加____，如牛黃酸等化學(xué)物質(zhì)時(shí)，就可誘導(dǎo)ES細(xì)胞向不同組織分化。

（3）步驟③中，需要構(gòu)建含有Rag2因的表達(dá)載體。可以根據(jù)Rag2基因的_____設(shè)計(jì)引物，利用______ 技術(shù)擴(kuò)增Rag2基因片段，該基因表達(dá)載體的組成，還必須有______，___________________ 以及標(biāo)記基因等。

（4）為檢測Rag2基因的表達(dá)情況，除分子檢測外有時(shí)還管要進(jìn)行_______水平的鑒定。

Answer 1

【答案】顯微操作（去核法）方法 內(nèi)細(xì)胞團(tuán) 分化誘導(dǎo)因子 核苷酸序列 PCR 啟動(dòng)子 終止子 個(gè)體生物學(xué)

【解析】

分析題圖：圖示是利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對干擾素基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療的流程，其中①表示獲得重組胚胎的過程；②表示早期胚胎培養(yǎng)過程；③表示采用基因工程技術(shù)將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞。

（1）①中在核移植前通常使用顯微操作方法去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核。
（2）步驟中，重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時(shí)，可從內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離出ES細(xì)胞。在培養(yǎng)液中添加分化誘導(dǎo)因子，如牛黃酸等化學(xué)物質(zhì)時(shí)，就可誘導(dǎo)ES細(xì)胞向不同組織分化。
（3）步驟③中，需要構(gòu)建含有Rag2因的表達(dá)載體�？梢愿鶕�(jù)Rag2基因的核苷酸序列設(shè)計(jì)引物，再利用PCR技術(shù)擴(kuò)增Rag2基因片段。該基因表達(dá)載體的組成，必須有啟動(dòng)子、終止子以及標(biāo)記基因等。
（4）為檢測Rag2基因的表達(dá)情況，除分子檢測外，有時(shí)還管要進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的堅(jiān)定。