(11分)2008年諾貝爾化學獎授予了三位在研究綠色熒光蛋白(GFP)方面做出突出貢獻的科學家。綠色熒光蛋白能在藍光或紫外光的激發(fā)下發(fā)出綠色熒光,這樣借助GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質在細胞內(nèi)部的移動情況,幫助推斷蛋白質的功能。已知GFP基因最初從發(fā)光水母中提取出來。GFP基因可作為目的基因用于培育綠色熒光小鼠,下圖表示培育綠色熒光小鼠的基本流程,請分析回答:

(1)用于培育綠色熒光小鼠的基因表達載體的組成必須有啟動子、_______和_______。圖中①過程需要的工具酶有________和______;過程②常用的方法是_______________;過程③利用的生物技術是________;在進行過程④前,利用________技術可以獲得數(shù)目更多且基因型相同的綠色熒光小鼠。

(2)水母的GFP基因之所以能“嫁接”到小鼠染色體的DNA上,其原因是___________________。

(3)GFP基因有時還可與其他目的基因一起構建到載體上,不影響目的基因的表達,且對細胞無毒害作用,因此GFP基因可以作為基因表達載體上的________。

(4)目前科學家們通過________工程制造出了藍色熒光蛋白、黃色熒光蛋白等,該工程是直接改造GFP分子,還是改造GFP基因?________________。

 

【答案】

(1)GFP基因   終止子(兩空順序可以顛倒)  限制性核酸內(nèi)切酶 DNA連接酶(兩空順序可以顛倒)  顯微注射法 早期胚胎培養(yǎng)技術(或:細胞培養(yǎng)技術) 胚胎分割

(2)GFP基因和小鼠DNA分子的空間結構、化學組成相同 

   (3)標記基因 

(4)蛋白質 改造GFP基因

【解析】(1)基因表達載體必須有啟動子、終止子、目的基因和標記基因。構建基因表達載體需要限制酶和DNA連接酶。將目的基因導入動物細胞常用顯微注射法,過程③稱為早期胚胎培養(yǎng);利用胚胎分割移植技術可獲得大量基因型相同的個體。

(2)由于GFP基因和小鼠DNA分子的空間結構、化學組成相同,所以水母的GFP基因之所以能“嫁接”到小鼠染色體的DNA上。

(3)由于GFP基因能夠表達出綠色熒光蛋白,所以GFP基因可以作為基因表達載體上的標記基因。

(4)藍色熒光蛋白、黃色熒光蛋白是自然界沒有的蛋白質,所以屬于蛋白質工程,直接改造GFP基因。

 

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2008年諾貝爾化學獎授予了“發(fā)現(xiàn)和發(fā)展了水母綠色熒光蛋白”的三位科學家。將綠色熒光蛋白基因的片段與目的基因連接起來組成一個融合基因,再將該融合基因轉入真核生物細胞內(nèi),表達出的蛋白質就會帶有綠色熒光。綠色熒光蛋白在該研究中的主要作用是

A.追蹤目的基因在細胞內(nèi)的復制過程

B.追蹤目的基因插入到染色體上的位置

C. 追蹤目的基因編碼的蛋白質在細胞內(nèi)的分布

D.追蹤目的基因編碼的蛋白質的空間結構

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(09安徽卷)4.2008年諾貝爾化學獎授予了“發(fā)現(xiàn)和發(fā)展了水母綠色熒光蛋白“的三位科學家。將綠色熒光蛋白基因的片段與目的基因連接起來組成一個融合基因,再將該融合基因轉入真核生物細胞內(nèi),表達出的蛋白質就會帶有綠色熒光。綠色熒光蛋白在該研究中的主要作用是

A.追蹤目的基因在細胞內(nèi)的復制過程

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2008年諾貝爾化學獎授予了三位在研究綠色熒光蛋白(GFP)方面做出突出貢獻的科學家。綠色熒光蛋白能在藍光或紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光,這樣借助GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質在細胞內(nèi)部的移動情況,幫助推斷蛋白質的功能。下圖為我國首例綠色熒光蛋白(GFP)轉基因克隆豬的培育過程示意圖,據(jù)圖回答:

(1)圖中通過過程①、②形成重組質粒,需要限制酶切取目的基因、切割質粒。限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識別序列和切點是—GGATCC—,限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識別序列和切點是—GATC—。在質粒上有酶Ⅰ的一個切點,在目的基因的兩側各有1個酶Ⅱ的切點。
①請畫出質粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。
②在DNA連接酶的作用下,上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端是否可以連接起來,        理由是:               。
(2)過程③將重組質粒導入豬胎兒成纖維細胞時,采用最多也最有效的方法是______。
(3)如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達的基因一起構建到載體上,GFP基因可以作為基因表達載體上的標記基因,其作用是                 。獲得的轉基因克隆豬,可以解決的醫(yī)學難題是,可以避免                。

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A.跟蹤大腦神經(jīng)細胞的發(fā)育                B.觀察癌細胞的擴散

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