Question

【題目】隨著社會(huì)的發(fā)展，石油產(chǎn)品的使用越來(lái)越多，石油烴污染也越來(lái)越嚴(yán)重。為了篩選出分解石油烴能力強(qiáng)的微生物，人們不斷地進(jìn)行研究。下圖為獲取能分離出分解石油烴的微生物的土壤樣品后的研究過(guò)程，請(qǐng)回答有關(guān)問(wèn)題：

(1)獲取土壤樣品的取樣地點(diǎn)最好選在_________。為了能有效地分離出分解石油烴的微生物,過(guò)程①④所用的選擇培養(yǎng)基只能以石油烴作為唯一碳源，其原因是_____________。

(2)根據(jù)⑤平板上生長(zhǎng)的菌落，對(duì)④進(jìn)行接種采用的方法是______________,若發(fā)現(xiàn)在⑤中無(wú)法區(qū)分菌落，可以將圖中③取出的菌液_____________。

(3)純化菌株時(shí)，通常使用的劃線工具是_________。采用________方法對(duì)其進(jìn)行滅菌。劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后,第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌落,第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無(wú)菌落，其他劃線上有菌落。造成劃線無(wú)菌落可能的操作失誤是_______________(寫出一點(diǎn)即可)。

Answer 1

【答案】 石油烴污染明顯處 只有能利用石油烴的微生物能正常生長(zhǎng)繁殖 涂布分離 進(jìn)行（梯度）稀釋 接種環(huán) 灼燒 接種環(huán)灼燒后未冷卻；劃線未從第一區(qū)域末端開始劃線

【解析】試題分析：微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

（1）要獲取相應(yīng)的菌種，應(yīng)到相應(yīng)的環(huán)境中獲取，獲取土壤樣品的取樣地點(diǎn)最好選在石油污染明顯處；有些培養(yǎng)基可以抑制其他微生物的生長(zhǎng)，這樣的培養(yǎng)基可稱做選擇培養(yǎng)基；因此，為了能有效地分離出分解石油烴的微生物，過(guò)程①一④所用培養(yǎng)基，其成分的特點(diǎn)是只含石油烴一種碳源，從而有利于目的菌的生長(zhǎng)，抑制其他微生物的生長(zhǎng)。

（2）④中的培養(yǎng)基從物理特征看屬于固體培養(yǎng)基，可加入凝固劑瓊脂處理，常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法；根據(jù)⑤平板上生長(zhǎng)的菌落，對(duì)④進(jìn)行接種采用的方法是涂布分離；若⑤中發(fā)現(xiàn)無(wú)法區(qū)分菌落，說(shuō)明稀釋度不夠，可以將重新進(jìn)行梯度稀釋。

（3）純化菌株時(shí)，通常使用的劃線工具是接種環(huán)，采用灼燒方法對(duì)其進(jìn)行滅菌。劃線的某個(gè)平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長(zhǎng)滿了菌落，第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無(wú)菌落，其他劃線上有菌落；造成劃線無(wú)菌落可能的操作失誤是接種環(huán)灼燒后未冷卻；劃線未從第一區(qū)域末端開始劃線。