回答下列有關(guān)基因工程和克隆技術(shù)的問題。（10分）
2006年12月22日，我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬在東北農(nóng)業(yè)大學(xué)的種豬場自然分娩產(chǎn)出，這標(biāo)志著我國在轉(zhuǎn)基因克隆豬技術(shù)領(lǐng)域已達(dá)到世界領(lǐng)先水平。下圖為我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖，請據(jù)圖回答：
63、說出綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程中用到了哪些生物工程技術(shù)？
利用了哪些原理？ （本題答案從下列所給選項中選擇填寫）
①轉(zhuǎn)基因技術(shù)；②細(xì)胞核移植技術(shù)；③胚胎移植技術(shù)；④干細(xì)胞技術(shù)；⑤動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)
⑥基因突變；⑦基因重組；⑧動物細(xì)胞核具有全能性；⑨動物細(xì)胞具有全能性
64、過程①②中必需用到的酶分別是 和 。綠色熒光蛋白基因之所以能與質(zhì)粒重組，原因是 。
65、早期胚胎的培養(yǎng)液成分較復(fù)雜，除一些無機(jī)鹽和有機(jī)鹽類外，還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分，以及 等物質(zhì)。
通過上圖中過程①的方法獲取目的基因的數(shù)量是有限的，要獲得大量的綠色熒光蛋白基因可以利用PCR技術(shù)。PCR擴(kuò)增反應(yīng)（如下圖所示）中加入的TaqDNA聚合酶能在接近沸點的條件下，發(fā)揮延伸DNA子鏈的作用，將單個脫氧核苷酸連續(xù)結(jié)合到雙鏈DNA片段的引物鏈上。請回答：
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PCR（DNA聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)示意圖：
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66、你認(rèn)為TaqDNA聚合酶一定是從下列哪種生物體細(xì)胞中分離提取的？
A．水母細(xì)胞 B．豬胎兒成纖維細(xì)胞 C．極端嗜熱菌 D．大腸桿菌
67、下面的表達(dá)式不能反映TaqDNA聚合酶的功能，為什么？ 。
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68、用限制酶EcoRV、MboI單獨或聯(lián)合切割同一種質(zhì)粒，得到DNA片段長度如下圖（1kb即1000個堿基對），請在答題卡的指定位置畫出質(zhì)粒上EcoRV、MboI的切割位點和標(biāo)出堿基對數(shù)。（2分）
智慧課堂密卷100分單元過關(guān)檢測系列答案
單元期中期末卷系列答案科目：高中生物 來源：2011年普通高等學(xué)校招生全國統(tǒng)一考試生物卷（上海） 題型：綜合題
回答下列有關(guān)基因工程的問題。
(1)基因工程中使用的限制酶，其特點是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
下圖四種質(zhì)粒含有E1和E2兩種限制酶的識別，Apr表示抗青霉素的抗性基因，Tcr表示抗四環(huán)素的抗性基因。
(2)將兩端用E1切開的Tcr基因與用E1切開的質(zhì)粒X－1混合連接，連接后獲得的質(zhì)粒類型有＿＿＿＿＿＿＿＿＿。（可多選）
| A．X－1 |
| B．X－2 |
| C．X－3 |
| D．X－4 |
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科目：高中生物 來源：2010年福建省泉州第第七中學(xué)高二下學(xué)期期中考試生物卷 題型：綜合題
（11分）回答下列有關(guān)基因工程的相關(guān)問題
（1）“分子手術(shù)刀”是指：＿＿＿＿＿，其來源主要是從＿＿＿＿＿生物中分離純化出來的，其切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：＿＿＿＿＿末端和＿＿＿＿＿末端
（2）“分子縫合針”是指：＿＿＿＿＿，催化形成的是兩個核苷酸之間的＿＿＿＿＿鍵。
（3）“分子運(yùn)輸車”是指載體，最常用的載體是＿＿＿＿＿,它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨立于細(xì)菌擬核DNA之外，并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。
（4）基因工程的基本操作程序：
第一步：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿；第二步：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿；第三步：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿；第四步：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
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科目：高中生物 來源：2011-2012學(xué)年浙江省十二校新高考研究聯(lián)盟高三第一次聯(lián)考生物試卷 題型：綜合題
回答下列有關(guān)基因工程和細(xì)胞工程、胚胎工程的問題：
（1）在基因工程的具體操作中，源自不同生物的DNA之所以能夠重組的原因是：
▲ ；相同的基因在不同的生物體內(nèi)，都能成功表達(dá)出相同的產(chǎn)物，其原因是： ▲ 。
（2）在基因工程中，使用標(biāo)記基因的目的是： ▲ ；基因工程最終獲得成功的標(biāo)志是： ▲ 。
（3）在植物組織培養(yǎng)的再分化過程中，若要將愈傷組織誘導(dǎo)出根，則植物生長調(diào)節(jié)劑的濃度配比應(yīng)為：生長素濃度 ▲ 細(xì)胞分裂素濃度（填“大于”、“小于”或“等于”）。
（4）動物細(xì)胞克隆（克隆培養(yǎng)法）要取得成功的最基本要求是 ▲ 。為提高克隆形成率，還應(yīng)該在培養(yǎng)基中加入 ▲ 以支持生長。同時，使用CO2培養(yǎng)箱用于 ▲ 。
（5）在胚胎工程中，若要獲得多個卵細(xì)胞，則需對母畜作 ▲ 處理，若要出現(xiàn)“不同的母親產(chǎn)下完全相同的后代”這一現(xiàn)象，則使用的技術(shù)為 ▲ 。
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科目：高中生物 來源：2011-2012學(xué)年寧夏高三上學(xué)期第一次月考（理綜）生物試卷 題型：綜合題
【生物——選修3現(xiàn)代生物科技專題】（15分）
請回答下列有關(guān)基因工程的問題：
（1）如果用某種生物發(fā)育的某個時期的mRNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的 片段，與載體連接后儲存在一個受體菌群中，這個受體菌群體就叫做這種生物的 。
（2）一個基因表達(dá)載體的組成，除了目的基因外，還必須有 ， 以及 。
（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程，稱為 。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞采用最多的方法是 法。轉(zhuǎn)基因動物中采用最多，也是最為有效的一種將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞的方法是 。大腸桿菌最常用的轉(zhuǎn)化方法是：首先用 處理細(xì)胞，使細(xì)胞處于一種 的生理狀態(tài)，這種狀態(tài)的細(xì)胞被稱作感受態(tài)細(xì)胞。然后將重組表達(dá)載體DNA溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度條件下促進(jìn) ，完成轉(zhuǎn)化過程。
（4）目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后，是否可以穩(wěn)定維持和表達(dá)其遺傳特性，只有通過檢測與鑒定才能知道。首先，要檢測轉(zhuǎn)基因生物 上是否插入了目的基因。其次，還需要檢測目的基因是否 。最后檢測目的基因是否 。
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科目：高中生物 來源：2011年普通高等學(xué)校招生全國統(tǒng)一考試生物卷（上海） 題型：綜合題
回答下列有關(guān)基因工程的問題。
(1)基因工程中使用的限制酶，其特點是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
下圖四種質(zhì)粒含有E1和E2兩種限制酶的識別，Apr表示抗青霉素的抗性基因，Tcr表示抗四環(huán)素的抗性基因。
(2)將兩端用E1切開的Tcr基因與用E1切開的質(zhì)粒X－1混合連接，連接后獲得的質(zhì)粒類型有＿＿＿＿＿＿＿＿＿。（可多選）
A．X－1
B．X－2
C．X－3
D．X－4
(3)若將上圖所示X－1、X－2、X－3、X－4四種質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌，然后分別涂布在含有青霉素或四環(huán)素的兩種培養(yǎng)基上。在這兩種培養(yǎng)上均不能生長的大腸桿菌細(xì)胞類型有＿＿＿＿＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
(4)如果X－1用E1酶切，產(chǎn)生850對堿基和3550對堿基兩種片段：那么質(zhì)粒X－2（Tcr基因的長度為1200對堿基）用E2酶切后的片段長度為＿＿＿＿＿＿＿＿＿對堿基。
(5)若將外源的Tcr基因兩端用E2切開，再與用E2切開的X－1混合連接，并導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞，結(jié)果顯示，含X－4的細(xì)胞數(shù)與含X－1的細(xì)胞數(shù)之比為13，增大DNA連接酶用量能否提高上述比值？＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
原因是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
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67. TaqDNA聚合酶只能將單個脫氧核苷酸連續(xù)結(jié)合到雙鏈DNA片段的引物鏈上（不是連接磷酸二酯鍵）
