【題目】我國公布的禁止進(jìn)境檢疫的有害生物煙草環(huán)斑病毒(TRSV)是RNA病毒。檢疫部門取煙草葉片進(jìn)行該病毒的診斷和檢測,將待測樣品利用RTPCR技術(shù)(逆轉(zhuǎn)錄PCR,具有靈敏度高、特異性強(qiáng)的優(yōu)勢)擴(kuò)增樣品。下圖1是RTPCR技術(shù)的過程示意圖,圖2是PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的電泳圖。請回答下列問題:

(1) 圖1過程①表示利用RNA獲得cDNA,該過程需要________酶的參與,過程②需要加入________酶。

(2) 待測樣品中RNA的提供者可能是________________,也可能只是________。

(3) 圖1過程①需要加入引物P2,該引物是依據(jù)________________的序列設(shè)計(jì)并生產(chǎn)的。過程②引物P2、P1都需加入,理由是__________________________。

(4) 已知圖2中電泳帶1是取自未感染的煙葉樣品電泳結(jié)果,電泳帶2是不同大小DNA的標(biāo)準(zhǔn)參照,據(jù)圖分析可以得出的結(jié)論是________,理由是______________________________。

【答案】反轉(zhuǎn)錄 熱穩(wěn)定DNA聚合(Taq) 煙草(葉片) TRSV 煙草 TRSV蛋白外殼基因 DNA兩條鏈的合成需要不同的引物 電泳帶3對應(yīng)的樣品感染了TRSV 電泳帶3和電泳帶1相比出現(xiàn)了分子量大約是600 bp的DNA電泳帶

【解析】

本題以圖文結(jié)合為情境,考查學(xué)生對基因工程的基本操作程序等相關(guān)知識的識記和理解能力,以及獲取信息、分析問題的能力。

(1)圖1中,過程①表示利用RNA獲得cDNA的逆轉(zhuǎn)錄過程,該過程需要反轉(zhuǎn)錄酶的參與;過程②表示利用PCR技術(shù)擴(kuò)增TRSV外殼蛋白基因cDNA的過程,需要加入熱穩(wěn)定DNA聚合酶(或Taq酶)。

(2)由題意“檢疫部門取煙草葉片進(jìn)行該病毒的診斷和檢測”可推知:待測樣品中RNA的提供者可能是煙草和TRSV,也可能只是煙草。

(3)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前提是:要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根據(jù) 這一序列合成引物。圖1中,過程①的產(chǎn)物是TRSV外殼蛋白基因,因此加入的引物P2是依據(jù)TRSV蛋白外殼基因的序列設(shè)計(jì)并生產(chǎn)的。過程②在擴(kuò)增TRSV蛋白外殼基因時(shí),兩條模板鏈的堿基序列不同,與這兩條模板鏈結(jié)合的引物也不同,即DNA兩條鏈的合成需要不同的引物,因此引物P2、P1都需加入。

(4)在圖2中,已知電泳帶2是不同大小DNA的標(biāo)準(zhǔn)參照,電泳帶1是取自未感染的煙葉樣品電泳結(jié)果,說明電泳帶1對應(yīng)的DNA只來自煙葉。對比分析電泳帶1、2、3可知:電泳帶3和電泳帶1相比出現(xiàn)了分子量大約是600 bp的DNA電泳帶,據(jù)此得出的結(jié)論是:電泳帶3對應(yīng)的樣品感染了TRSV。

練習(xí)冊系列答案
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