Question

【題目】近年來研究發(fā)現(xiàn)川楝素具有良好的抑制癌細(xì)胞增殖的能力。某研究人員為驗(yàn)證川楝素對人胃癌 MGC-803 細(xì)胞的生長具有明顯的抑制作用，且該作用隨著川楝素濃度的增加和作用時(shí)間的延長愈發(fā)明顯，從而為川楝素在胃癌治療領(lǐng)域的開發(fā)利用提供理論依據(jù)。請根據(jù)以下所給材料及用具完善實(shí)驗(yàn)思路。

材料用具：人胃癌 MGC-803 細(xì)胞懸液，完全培養(yǎng)液，以完全培養(yǎng)液配置的濃度分別為30、50、70nmol/L的川楝素溶液，5%CO2培養(yǎng)箱，12孔細(xì)胞培養(yǎng)板，酶標(biāo)儀（檢測各組的平均活細(xì)胞數(shù)）等。

要求與說明：細(xì)胞生長抑制率=（1-實(shí)驗(yàn)組的平均活細(xì)胞數(shù)/對照組的平均活細(xì)胞數(shù)）×100%，實(shí)驗(yàn)條件適宜

（1）實(shí)驗(yàn)思路：

①將12孔細(xì)胞培養(yǎng)板平均分成________組，分別加入________________________和________________________，于_________________中培養(yǎng)至細(xì)胞的對數(shù)生長期。

②給各組細(xì)胞培養(yǎng)板分別加入_____________________。

③將各組細(xì)胞培養(yǎng)板于適宜且相同環(huán)境下培養(yǎng)，24、48、72h分別用酶標(biāo)儀檢測各組的平均活細(xì)胞數(shù)，并計(jì)算各組細(xì)胞的生長抑制率。

④對所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)、分析和處理。

（2）實(shí)驗(yàn)結(jié)果：__________（請以川楝素溶液濃度為橫坐標(biāo)，繪制不同時(shí)間下的抑制率曲線）。

（3）實(shí)驗(yàn)結(jié)論與

①實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)川楝素對人胃癌 MGC-803 細(xì)胞的生長具有明顯的抑制作用，且該作用呈一定________依賴性。

②經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)川楝素能夠?qū)⑷宋赴?/span> MGC-803 細(xì)胞阻滯在G1期進(jìn)而抑制細(xì)胞增殖，其原理可能是_________________。

Answer 1

【答案】4 人胃癌MGC-803細(xì)胞懸液 完全培養(yǎng)液 5%CO2培養(yǎng)箱 濃度分別為30、50、70nmol/L的川楝素溶液 時(shí)間和劑量 抑制細(xì)胞周期內(nèi)某些特定基因的表達(dá)、促進(jìn)某些特定蛋白質(zhì)的分解

【解析】

該實(shí)驗(yàn)是為驗(yàn)證川楝素對人胃癌MGC-803細(xì)胞的生長具有明顯的抑制作用，采用了以完全培養(yǎng)液配置的濃度分別為30、50、70nmol/L的川楝素溶液3個(gè)梯度來探究川楝素對人胃癌MGC-803細(xì)胞的生長的抑制作用。實(shí)驗(yàn)中還需要對照組進(jìn)行對比觀察，故12孔細(xì)胞培養(yǎng)板需分為4組，加入人胃癌MGC-803細(xì)胞懸液、完全培養(yǎng)液于5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至細(xì)胞的對數(shù)生長期后，用3個(gè)梯度的川楝素溶液進(jìn)行處理，在適宜且相同環(huán)境下培養(yǎng)，24、48、72h分別用酶標(biāo)儀檢測各組的平均活細(xì)胞數(shù)，并計(jì)算各組細(xì)胞的生長抑制率。由于川楝素對人胃癌MGC-803細(xì)胞的生長的抑制作用隨著川楝素濃度的增加和作用時(shí)間的延長愈發(fā)明顯，故能推斷出該3個(gè)梯度處理的細(xì)胞生長抑制率為24h＜48h＜72h，且川楝素對人胃癌MGC-803細(xì)胞的生長的抑制作用與作用時(shí)間和濃度有關(guān)。

（1）①實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中都需要設(shè)計(jì)對照組，這樣才能消除無關(guān)變量對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，故將12孔細(xì)胞培養(yǎng)板平均分成4組，本實(shí)驗(yàn)是為驗(yàn)證川楝素對人胃癌MGC-803細(xì)胞的生長的抑制作用，分別需要將人胃癌MGC-803細(xì)胞培養(yǎng)至適宜實(shí)驗(yàn)的前提下，才能對人胃癌MGC-803細(xì)胞進(jìn)行川楝素處理，故需要先加入人胃癌MGC-803細(xì)胞懸液和完全培養(yǎng)液，于5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至細(xì)胞的對數(shù)生長期。
②在人胃癌MGC-803細(xì)胞達(dá)到進(jìn)行實(shí)驗(yàn)條件后，給各組細(xì)胞培養(yǎng)板分別加入30、50、70nmol/L的川楝素溶液，空白組不添加。
（2）結(jié)合題干信息給出的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，曲線圖為：

（3）①實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)川楝素對人胃癌MGC-803細(xì)胞的生長具有明顯的抑制作用，且川楝素對人胃癌MGC-803細(xì)胞的生長的抑制作用與作用時(shí)間和濃度有關(guān)，故該作用呈一定時(shí)間和劑量依賴性。
②經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)川楝素能夠?qū)⑷宋赴?/span>MGC-803細(xì)胞阻滯在G1期進(jìn)而抑制細(xì)胞增殖，分裂間期是為分裂期進(jìn)行物質(zhì)準(zhǔn)備的，完成DNA分子的復(fù)制和有關(guān)蛋白質(zhì)的合成，故其原理可能是抑制細(xì)胞周期內(nèi)某些特定基因的表達(dá)、促進(jìn)某些特定蛋白質(zhì)的分解。