Question

【題目】將蘇云金桿菌Bt蛋白的基因?qū)�入棉花�?xì)胞中,可獲得抗棉鈴蟲的轉(zhuǎn)基因棉,其過程如下圖所示(注:農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)粒上只有T-DNA片段能轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞中)。

(質(zhì)粒中“Bt”代表“Bt基因”,“KmR”代表“卡那霉素抗性基因”)

(1)過程①需用______________酶對(duì)含Bt基因的DNA和Ti質(zhì)粒進(jìn)行酶切。為將過程②獲得的含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌篩選出來,應(yīng)使用__________培養(yǎng)基。

(2)過程③中將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng),旨在讓___________________進(jìn)入棉花細(xì)胞;除盡農(nóng)桿菌后,還須轉(zhuǎn)接到含卡那霉素的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng),目的是_______________________。

(3)若過程④僅獲得大量的根,則應(yīng)在培養(yǎng)基中增加________________________以獲得芽;部分接種在無激素培養(yǎng)基上的芽也能長根,原因是_________________。

(4)檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因棉的抗蟲性狀,常用方法是________。種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉能減少____的使用,以減輕環(huán)境污染。

Answer 1

【答案】限制性核酸內(nèi)切 選擇 T-DNA 篩選獲得T-DNA片段的植物細(xì)胞 細(xì)胞分裂素濃度 芽頂端合成的生長素向基部運(yùn)輸,促進(jìn)根的分化 投放棉鈴蟲 農(nóng)藥

【解析】

據(jù)圖分析，①表示構(gòu)建基因表達(dá)載體，②表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞（采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法）；③將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)，并脫分化形成愈傷組織；④表示再分化形成芽；⑤表示將芽培養(yǎng)成試管苗。

（1）過程①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，需要同種限制性核酸內(nèi)切對(duì)含有Bt基因的DNA和Ti質(zhì)粒進(jìn)行酶切，然后再利用DNA連接酶構(gòu)建重組質(zhì)粒；篩選含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌應(yīng)該使用選擇培養(yǎng)基。

（2）過程③中將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)的目的是讓T-DNA進(jìn)入棉花細(xì)胞；卡那霉素的作用是篩選獲得T-DNA片段的植物細(xì)胞。

（3）過程④中，在培養(yǎng)基中增加細(xì)胞分裂素濃度可以獲得大量的芽；同時(shí)芽頂端合成的生長素向基部運(yùn)輸，也能促進(jìn)根的分化。

（4）檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因棉的抗蟲性狀，常用方法是投放棉鈴蟲，若棉鈴蟲大量死亡，說明轉(zhuǎn)基因成功。種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉能減少農(nóng)藥的使用，以減輕環(huán)境污染。