Question

【題目】將蘇云金芽孢桿菌Bt毒蛋白基因?qū)�入棉花�?xì)胞中，可獲得轉(zhuǎn)基因抗蟲棉，其過(guò)程如圖所示：

（1）過(guò)程①所需要的酶是____________，卡那霉素抗性基因的作用是_______________________。

（2）過(guò)程③將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)，旨在讓重組Ti質(zhì)粒上的__________________轉(zhuǎn)移進(jìn)入棉花細(xì)胞，并整合到棉花細(xì)胞的___________上。

（3）若要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因棉花細(xì)胞中Bt毒蛋白基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA,采用________________________技術(shù)，用_______________做探針；若要鑒定轉(zhuǎn)基因棉花是否被賦予抗蟲特性，需要做____________實(shí)驗(yàn)。

（4）種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉可以大大減少_____________的使用，以減輕環(huán)境污染。

Answer 1

【答案】限制酶和DNA連接酶 作為標(biāo)記基因，檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞（供重組DNA的鑒定和選擇） T-DNA 染色體DNA 分子雜交 標(biāo)記的Bt毒蛋白（目的）基因 抗蟲接種 農(nóng)藥（殺蟲劑）

【解析】

分析題圖：圖示為轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的培育過(guò)程圖，主要包括：①基因表達(dá)載體的構(gòu)建；②將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞（采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法）；③將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)，并脫分化形成愈傷組織，④⑤再分化、發(fā)育，將離體棉花植株培育成抗蟲棉還需采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)。

（1）過(guò)程①為基因表達(dá)載體的構(gòu)建，需要同種限制酶對(duì)含有Bt基因的DNA和Ti質(zhì)粒進(jìn)行酶切和連接，故需要的工具酶有限制酶和DNA連接酶�？�那霉素抗性基因作為標(biāo)記基因，其作用是檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，供重組DNA的鑒定和選擇。

（2）過(guò)程③中將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)的目的是讓T-DNA進(jìn)入棉花細(xì)胞，并整合到棉花細(xì)胞的染色體DNA上。

（3）若要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因棉花細(xì)胞中Bt毒蛋白基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，應(yīng)采用核酸分子雜交技術(shù)，用標(biāo)記的Bt毒蛋白（目的）基因做探針；檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因棉的抗蟲性狀，常用方法是投放棉鈴蟲，做抗蟲接種實(shí)驗(yàn)，若棉鈴蟲大量死亡，說(shuō)明轉(zhuǎn)基因成功。

（4）種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉能減少農(nóng)藥的使用，以減輕環(huán)境污染。