Question

【題目】PCR技術(shù)有效地解決了因?yàn)闃悠分?/span>DNA含量太低而難以對樣品進(jìn)行研究的問題，而被廣泛應(yīng)用，此過程需要一種Taq DNA聚合酶。請回答有關(guān)問題：

（1）體內(nèi)DNA復(fù)制過程中用解旋酶打開雙鏈DNA，而PCR技術(shù)中應(yīng)用________________。

（2）Taq DNA聚合酶是從水生耐熱細(xì)菌Taq中分離的。

①Taq DNA聚合酶的功能是_________________________________。

②Taq DNA聚合酶的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì)，可用______________法和_____________法進(jìn)行分離。

（3）相對于細(xì)菌分離，DNA分子的分離和提取操作要復(fù)雜的多。

①在DNA提取中兩次用到蒸餾水，其目的分別是________________________、_________________________________。

②實(shí)驗(yàn)中能否以哺乳動物成熟的紅細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)材料？__________________________為什么？______________________________________________________。

（4）PCR中加入的引物有_________種，加入引物的作用是_______________________________。

Answer 1

【答案】高溫使DNA分子熱變性 催化脫氧核苷酸之間形成磷酸二酯鍵 凝膠色譜 電泳 使血細(xì)胞破裂，釋放出DNA分子 稀釋NaCl溶液，使DNA分子析出 不能 哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中無核DNA分子 2 作為DNA復(fù)制的起點(diǎn)

【解析】

PCR技術(shù)：
1、概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)；
2、原理：DNA復(fù)制；

3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物；
4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；
5、過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈．PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開。

（1）體內(nèi)DNA復(fù)制過程中用解旋酶打開雙鏈DNA，而PCR技術(shù)中應(yīng)用高溫使DNA分子熱變性。

（2）①Taq DNA聚合酶催化脫氧核苷酸之間形成磷酸二酯鍵。

②TaqDNA聚合酶的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì)，可用凝膠色譜法和電泳法進(jìn)行分離。

（3）①在DNA提取中兩次用到蒸餾水，第一次的目的是使血細(xì)胞吸水破裂，釋放出DNA分子、第二次是稀釋NaCl溶液，使DNA分子析出。

②實(shí)驗(yàn)中不能以哺乳動物成熟的紅細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)材料，原因是哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中無DNA分子。

（4）PCR中加入的引物有2種，加入引物的作用是分別與兩條單鏈的一端結(jié)合，作為DNA復(fù)制的起點(diǎn)。