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【題目】如今人類已跨入了蛋白質時代,對蛋白質的研究和應用,首先需要獲得高純度的蛋白質。請回答下列問題:

(1)蛋白質的提取和分離一般分為四步:______、_____、______和純度鑒定。

(2)如果要從紅細胞中分離出血紅蛋白,實驗前取新鮮血液要在采血容器中預先加入檸檬酸鈉,這樣做的目的是_______

(3)裝填凝膠色譜柱時,要注意色譜柱內不能有氣泡存在,一旦發(fā)現(xiàn)有氣泡必須重新裝。這是因為氣泡會攪亂洗脫液中________,降低分離效果。

(4)如圖表示血紅蛋白提取和分離的部分實驗裝置,請據圖回答下列問題:

①甲裝置用于_________,目的是________。用乙裝置分離蛋白質的方法叫___________,是根據_______________________分離蛋白質的有效方法。

②用乙裝置分離血紅蛋白時,待______________________接近色譜柱的底端時,用試管收集流出液,每5 mL收集一管,連續(xù)收集。

【答案】樣品處理 粗分離 純化 防止血液凝固 蛋白質的洗脫次序 透析(粗分離) 去除樣品中相對分子質量較小的雜質 凝膠色譜法 相對分子質量的大小 紅色的蛋白質接近色譜柱的底端

【解析】

1)蛋白質的提取和分離一般分為四步:樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定。

步驟

操作

樣品處理

通過紅細胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液等操作收集到血紅蛋白溶液

粗分離

通過透析法去除血紅蛋白溶液中相對分子質量較小的雜質

純化

通過凝膠色譜法分離相對分子質量不同的蛋白質

純度鑒定

SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳對純化后的蛋白質進行純度鑒定

2)甲是透析裝置,乙是利用凝膠色譜法分離蛋白質的裝置。

(1) 蛋白質的提取和分離一般分為四步:樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定。

(2) 檸檬酸鈉是一種抗凝劑,在新鮮血液中加入檸檬酸鈉,可以防止血液凝固。

(3) 裝填凝膠色譜柱時,若產生氣泡,則氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質的洗脫次序,從而降低分離效果。

(4) ①甲是透析裝置,用于透析,其目的是去除樣品中相對分子質量較小的雜質,使大分子蛋白質保留在袋中。乙是利用凝膠色譜法分離蛋白質的裝置,是根據相對分子質量的大小分離蛋白質的有效方法。

由于血紅蛋白帶有紅色,當紅色的蛋白質接近色譜柱的底端時,用試管收集血紅蛋白,每5 mL收集一管,連續(xù)收集。

練習冊系列答案
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