Question

【題目】回答下列（一）、（二）小題

（一）回答有關(guān)微生物培養(yǎng)和篩選的問題

空氣中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板（培養(yǎng)基）收集教室空氣中的微生物，以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實(shí)驗(yàn)步驟如下：

①配制培養(yǎng)基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O）；

②制作無菌平板（培養(yǎng)基）；

③設(shè)置空白對(duì)照組和若干實(shí)驗(yàn)組，進(jìn)行相關(guān)操作；

④將各組平板置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時(shí)間，統(tǒng)計(jì)各組平板上菌落的平均數(shù)。

請(qǐng)回答下列問題：

（1）該培養(yǎng)基中微生物所需的氮源是____________________，成分X通常是________________。

（2）步驟③中，實(shí)驗(yàn)組的操作是將不同平板分別置于教室中的_______________，敞口靜置一段時(shí)間。

（3）若在某次調(diào)查中，某一高度實(shí)驗(yàn)組平板上菌落平均數(shù)為36個(gè)/平板，而空白對(duì)照組的一個(gè)平板上出現(xiàn)了6個(gè)菌落，這種結(jié)果說明在此次調(diào)查中培養(yǎng)基出現(xiàn)了___________現(xiàn)象。若要篩選出空氣中的真菌，應(yīng)加入__________________。

（二）從土壤中分離以尿素為氮源的細(xì)菌，實(shí)驗(yàn)過程如圖所示，請(qǐng)回答下列問題：

（1）圖中物質(zhì)A為_____________，B過程為___________。

（2）欲要統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中含________的細(xì)菌數(shù)目，宜采用_______________法接種到尿素培養(yǎng)基上。對(duì)照組配制的培養(yǎng)基為________________培養(yǎng)基。將相同濃度的土壤稀釋液分別接種在實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組培養(yǎng)基上，在37℃的_______________培養(yǎng)24-48h，觀察比較____________。

（3）富集培養(yǎng)指創(chuàng)設(shè)僅適合待分離微生物旺盛生長(zhǎng)的特定環(huán)境條件，使其在群落中的數(shù)量大大增加，從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法。對(duì)產(chǎn)耐高溫淀粉酶微生物的富集培養(yǎng)應(yīng)選擇__________________的培養(yǎng)基，并在________條件下培養(yǎng)。

Answer 1

【答案】牛肉膏和蛋白胨 瓊脂 不同高度 雜菌污染 抗生素 無菌水 稀釋 脲酶 涂布分離 LB全營(yíng)養(yǎng)（固體） 恒溫培養(yǎng)箱 菌落數(shù) 以淀粉為唯一碳源 高溫

【解析】

微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氨源、無機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。對(duì)異養(yǎng)微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營(yíng)養(yǎng)要素成分時(shí)并不是起單一方面的作用。

（一）（1）牛肉膏和蛋白胨都含有蛋白質(zhì)的水解產(chǎn)物，都可以作為氮源；平板為固體培養(yǎng)基，故需要加入瓊脂。

（2）實(shí)驗(yàn)探究的是教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布，其中自變量為不同高度，故需在不同高度下放置開蓋平板。

（3）在完全正確的操作情況下，空白對(duì)照組中不應(yīng)出現(xiàn)菌落。若出現(xiàn)菌落，說明操作過程中存在雜菌污染，屬于實(shí)驗(yàn)失誤，所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均不應(yīng)采用。若要篩選出空氣中的真菌，應(yīng)加入抗生素。

（二）（1）從土壤中分離以尿素為氮源的細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)流程：土壤取樣→樣品的稀釋→將稀釋液涂布到以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基上→挑選能生長(zhǎng)的菌落→鑒定。故圖中物質(zhì)A為無菌水，B過程為稀釋過程。

（2）欲要統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中含脲酶的細(xì)菌數(shù)目，宜采用涂布分離法接種到尿素培養(yǎng)基上。對(duì)照組配制的培養(yǎng)基為LB全營(yíng)養(yǎng)（固體）培養(yǎng)基。將相同濃度的土壤稀釋液分別接種在實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組培養(yǎng)基上，在37℃的恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)24-48h，觀察比較菌落數(shù)。

（3）富集培養(yǎng)指創(chuàng)設(shè)僅適合待分離微生物旺盛生長(zhǎng)的特定環(huán)境條件，使其在群落中的數(shù)量大大增加，從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法。對(duì)產(chǎn)耐高溫淀粉酶微生物的富集培養(yǎng)應(yīng)選擇以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基，并在高溫條件下培養(yǎng)。