Question

【題目】某工廠為了生產(chǎn)耐高溫植酸酶飼料添加劑，開展了產(chǎn)該酶菌株的篩選、酶的固定化及其特性分析研究，其流程如下圖所示。請(qǐng)回答：

（1）上壤懸液濘先經(jīng)80℃處理15分鐘，其目的是篩選出

（2）在無菌條件下，將經(jīng)過處理的土壤懸液進(jìn)行 ，然后涂布于含有植酸鈉的固體培養(yǎng)基上。培養(yǎng)后觀察到 ，其周圍出現(xiàn)透明水解圈，圈的直徑大小與 強(qiáng)弱相關(guān)。

（3）篩選獲得的菌株經(jīng)鑒定后，將優(yōu)良菌株進(jìn)行液體擴(kuò)大培養(yǎng)。培養(yǎng)時(shí)需要振蕩，其主要目的是 。液體培養(yǎng)基與固體培養(yǎng)基相比不含有的成分是 。

（4）在合適條件下，將提純的植酸酶與海藻酸鈉混合后，滴加到一定濃度的鈣離子溶液中，使液滴形成凝膠固體小球。該過程是對(duì)酶進(jìn)行 。

A．吸附 B．包埋 C．裝柱 D．洗滌

（5）溫度與植酸酶相對(duì)酶活性的關(guān)系如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是 。

A．測(cè)試溫度中，固定化與非固定化植酸酶的最適溫度分別為60℃和45℃

B．測(cè)試溫度范圍內(nèi)，固定化植酸酶的相對(duì)酶活性波動(dòng)低于非固定化植酸酶

C．固定化與非固定化植酸酶相比，相對(duì)酶活性在80%以上時(shí)的溫度范圍較寬

D．65℃時(shí)固定化與非固定化植酸酶的相對(duì)酶活性因蛋白質(zhì)變性而位于最低點(diǎn)

Answer 1

【答案】（1）耐高溫菌株

（2）稀釋 單菌落 植酸酶的活性

（3）供氧 瓊脂

（4）B

（5） D

【解析】

（1）土壤懸液首先經(jīng)80℃處理15分鐘的目的是使大多數(shù)的不耐高溫的微生物死亡而篩選出耐高溫菌株。

（2）土壤懸液懸液在無菌條件下進(jìn)行梯度稀釋，使用稀釋涂布平板法接種涂布于含有植酸鈉的固體培養(yǎng)基上，經(jīng)培養(yǎng)后可以觀察到單菌落的出現(xiàn)，且出現(xiàn)透明圈，透明圈的直徑大小與植酸酶的活性強(qiáng)弱相關(guān)。

（3）振蕩培養(yǎng)的目的是向培養(yǎng)液供氧，同時(shí)使微生物與培養(yǎng)液充分接觸，有利于微生物的繁殖與生長(zhǎng)。液體培養(yǎng)基與固體培養(yǎng)基在物理性質(zhì)上的主要區(qū)別是液體培養(yǎng)基不含凝固劑瓊脂。

（4）固定化酶和固定化細(xì)胞的方法主要有包埋法、物理吸附法和化學(xué)結(jié)合法。題干所述方法是將提純的植酸酶與海藻酸鈉混合后，滴加到一定濃度的鈣離子溶液中，使液滴形成凝膠固體小球，該過程屬于包埋法。 故選B。

（5）據(jù)圖分析，固定化與非固定化植酸酶的最適溫度分別為60℃和45℃，A正確；圖中，在測(cè)試溫度范圍內(nèi)，固定化植酸酶的相對(duì)酶活性波動(dòng)較小，低于非固定化植酸酶的波動(dòng)，B正確；據(jù)圖分析，固定化與非固定化植酸酶相比，相對(duì)酶活性在80%以上時(shí)的溫度范圍較寬，C正確；根據(jù)題意，植酸酶屬于耐高溫酶，65℃時(shí)固定化與非固定化植酸酶的相對(duì)酶活性不是因蛋白質(zhì)變性而位于最低點(diǎn)，D錯(cuò)誤。